真菌毒素的检验.ppt

关于真菌毒素的检验第1页，共36页，星期日，2025年，2月5日主要内容1.概述2.真菌毒素分类3.真菌毒素检测基本步骤第2页，共36页，星期日，2025年，2月5日1.概述真菌毒素--由真菌生产的有毒代谢产物。具有毒性、致癌性、致突变型和致畸性等。“毒蘑菇、迷神麦、醉谷病”真菌毒素的危害：（1）引起粮食作物的病害和产品腐败变质；（2）对人类和动物健康产生威胁。第3页，共36页，星期日，2025年，2月5日2.真菌毒素分类按产生菌可分为：曲霉毒素类、青霉毒素类、镰刀菌毒素类等。水活度（Aw对真菌生长和产毒影响较大。真菌毒素毒性：（1）致DNA损伤，有的致癌；（2）细胞毒性，有的破坏质膜和细胞酶的作用常见的真菌性食物中毒：黄曲霉毒素中毒、黄变米或灰变米中毒，赤霉沼渣粉中毒等。第4页，共36页，星期日，2025年，2月5日3.真菌毒素检测基本步骤1.采样和样品的准备（1）采样的地点根据分析目的的不同确定采样地点，如：农田、仓库、加工厂、运输工具、零售商和医院等。（2）采样方法1）静态样品的采集静态样品：麻袋、箱柜和车厢等容器存放分样品均属静态样品。采样工具：顶端尖锐的长柄采样钎子。采样数量：小批量时采1/4；大批量时为整批麻袋数第5页，共36页，星期日，2025年，2月5日2）动态样品的采集用商品化的十字交叉切分自动采样器（3）采样量采大样，按四分法对角连续多次分样缩减至1－2kg，最后取代表样全部粉碎。美国农业部USDA的方法：成批样每批取3份大样，每份22kg。实验室分析用的样品为1－5kg。第6页，共36页，星期日，2025年，2月5日2.提取1.提取溶剂溶剂的选择取决于待测毒素的种类、毒素性质、毒素在提取溶剂中的溶解度、提取溶剂的毒性价格、非测定成分在提取溶剂中的分配系数等。选用：毒性小、极性大、价格低廉的溶剂系统常用溶剂：甲醇、氯仿、丙酮、己烷、乙酸乙酯、乙睛和水中一种或多种不同配比的混合物。2.提取温度温度影响毒素的回收率，适当升高温度可以增加毒素的回收率。3.食品基质固体食品：选用浸剂、洗脱、索氏回流等方法。液体食品：液－液分配方法。提取酸性真菌毒素时，通常需提高提取溶剂系统中水相的pH值，使其有效地将被提取物碱化或形成水溶性碱混合物后，再进行提取。第7页，共36页，星期日，2025年，2月5日3.纯化纯化：在确保不损失待测毒素的前提下除去干扰杂质的过程称为纯化。常用净化方法：液－固萃取、液－液分配、化学吸附、色谱法、透析法以及SFE法等。使用最广泛的是色谱法。色谱法：薄层色谱法（柱色谱法最常用）吸附色谱柱常用的吸附剂：硅胶、矾土、氧化铝、活性炭、弗罗里硅土分配色谱柱常用的填充剂：硅藻土、纤维素。固相提取（广泛采用）免疫亲和柱IAC（应用于农产品的新技术）第8页，共36页，星期日，2025年，2月5日4.检测（1）薄层色谱法（2）高效液相色谱法（3）气相色谱法（4）酶联免疫吸附试验第9页，共36页，星期日，2025年，2月5日第二节主要真菌毒素及其检验1.黄曲霉毒素（1）特性（2）食品中来源（3）毒性与危害（4）检测方法第10页，共36页，星期日，2025年，2月5日霉菌霉菌均由分枝或不分枝的菌丝构成，许多菌丝交织在一起形成菌丝体，菌丝在光学显微镜下呈管状，2～10um比一般细菌放线菌细胞大几倍至几十倍，与酵母菌相似，而其菌丝又分为有隔菌丝和无隔菌丝，再就是根据其功能不同又分为营养菌丝，气生菌丝。无隔菌丝：菌丝为长管状，单细胞，细胞质内含多个核，其生长过程只表现为菌丝的延长和细胞核的裂殖增多，以及细胞质的增加，如毛霉，根霉，犁头霉。有隔菌丝：为大多数的。菌丝由横隔膜分隔成成串的多细胞，每个细胞内含有一个或多个细胞核，有些菌丝外观看起来像多细胞，但横隔膜上有小孔，使细胞质或细胞核，可自由流通，每个细胞功能也相同，如青、曲、白地霉。第11页，共36页，星期日，2025年，2月5日营养菌丝（基质菌丝）就是在生长过程中，伸入到培养的基质中，为真菌提供营养的菌丝。气生菌丝图（繁殖菌丝）它主要是伸入到菌周的空气环境中，它主要作用是产生孢子，产生孢子时的气生菌丝称繁殖菌丝。霉菌的繁殖主要是由繁殖器官产生孢子，繁殖器管是由繁殖菌丝产生的可以是单细胞，也可是多细胞，有时产生无性孢子，有时产生有性孢子，如青霉，曲霉，在生长过程中，由于生长条件的改变，有时产生有性孢子，有时产生无性孢子，但主要还是以无性孢子为主。有性孢子：子囊孢子，结合孢子，卵孢子，担孢子。无性孢子：分生孢子，关节孢子，芽生孢子，孢子襄孢子，厚膜孢子。第12页，共36页