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Absin多重荧光免疫组化服务

【技术原理】

多重荧光免疫组化（mIHC），主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大（Tyramidesignalamplification）是一类利用辣根过氧化酶（HRP）

对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor®、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。

TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应（酪胺盐在HRP催化H2O2下形成共价键结合位点），产生大量的酶促产物，该产物能与周围的蛋白

残基（包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基）结合，这样在抗原-抗体结合部位就有大量的生物素沉积，与随后加入的Streptavidin—HRP/荧光基团结合，经几

次这样的循环放大，可以结合大量的酶分子or荧光基团，结果使其检测信号得到几何级放大。

TSA多重荧光免疫组化染色示意图

简单来说，用这种方法做多重荧光染色是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。该荧光素在HRP和过

氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后进行微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结

合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，最后去检测结果。

【mIHC技术优势】

1.由于染色是多轮次进行，每次体系中都只有单一抗体孵育，因此无需担心抗体交叉反应，以及一抗二抗种属匹配问题，大大减少了实验设计时不同种属抗

体选择匹配的限制。

2.TSA技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪酰胺的信号放大技术能够提供极强的敏感度、检测极微量的目的抗原。极大的降低抗体的

用量，节约抗体，实测确实可以显著提升抗体的稀释比例。

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3.多重荧光免疫组化法，可同时进行九个指标十色成像，这种情况下发射光谱会重叠，我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染

色和显色法多重免疫组化所做不到的。这种方法能真实反映关键蛋白的表达情况和相互之间的关系，从而极大地节约珍贵的样品。

【Absin平台优势】

1.Absin与TISSUEGNOSTICS两大公司强强联手，共建联合实验室。Absin拥有10000+组织切片及1000+指标的多重荧光免疫组化染色经验，在评估肿瘤

微环境中各细胞组分的表达丰度，相互作用以及空间表型信息等领域深耕多年；TGTissueFAXsSpectraSystems全景多光谱组织扫描与定量分析系统，能够

实现大尺寸高倍率全自动连续光谱成像及可原位追溯的大数据Al深度空间量化分析功能；

2.兼有3DHISTECHPANNORAMICMIDIII扫描仪、HALO数字病理金标准分析平台，满足您的多样化需求；

3.资深多色团队共同服务客户，为您提供常见免疫微环境panel推荐、抗体推荐、项目探讨等售前售后咨询服务。

【爱必信多色服务】

我们可以提供的服务：

最多九指标十色（含DAPI）的多重荧光免疫组化服务，样本种属涵盖人、小鼠、大鼠、猪等；组织类型以肿瘤样本居多，涵盖肺、胃、肝、肾、肠等各大器官，

甲状腺、胰腺、唇腺、泪腺等各大腺体，另还有眼球、神经、大脑等特殊样本；切片类型涵盖石蜡切片、组织芯片（TMA）、冰冻切片、大组织切片、厚切片

等，并提供全片扫描和定量分析。

个性化服务（先做预实验，实验有保障，结果更完美！）

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