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转染全攻略

什么是转染？

转染——是指将外源基因如DNA、RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，

转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生

物学试验中，其应用越来越广泛。

细胞转染的分类

根据导入的核酸存在于宿主细胞的时间长短，我们可以将细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。

瞬转：瞬时转染的细胞中，外源基因得以表达但它们并不会整合到细胞的基因组中，也就不会被复制。细胞中瞬时

转染的外源基因表达时间有限，通常仅持续几天，直到外源基因在细胞分裂过程中因各种因素丢失为止。

稳转：稳定转染是建立在瞬时转染的基础上的，先对细胞进行转染，再对得到的细胞池进行筛选，在少数转染细胞

中，外源基因能够整合到细胞的基因组中。外源基因成为细胞基因组的一部分从而得以复制，这就是稳定转染细胞的标

志。稳定转染细胞的子代细胞也同样表达外源基因，由此形成稳定转染的细胞系。

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目前常见的细胞转染方法

1、化学介导法

01阳离子脂质体

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脂质体是一种人工的脂双层膜。可以将DNA包裹到亲水性核心内部，也可将其络合到磷脂片层。1992年，阳离子

脂质体首次被用于基因治疗的临床试验。阳离子脂质体通常由阳离子和两性离子脂质组成。在DNA与脂质体形成

lipoplex的过程中，阳离子脂质体起到复合和凝集DNA的作用，同时也有助于复合物与细胞膜的结合。常用的阳离子

脂质组分为DOTA,DOTMA,DOSPA,DOGS以及DC-chol，大量实验表明阳离子脂质体中的这类组分对细胞的毒性较

大，引起了人们的极大关注。此外，由于lipoplex的异质性和不稳定性，阳离子脂质体载体的转染效率明显低于病毒载

体。近年来，体内转染研究越来越火热，因阳离子脂质体在血清存在的情况下会迅速失活，无法直接应用于体内研究，

这是它的另一个缺点。目前，应用较为广泛的脂质体为InvitrogenLipofectamine,DharmaconDharmaFECT系列产

品。

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