Skp2与Ku70蛋白相互作用位点筛选.docx

Skp2与Ku70蛋白相互作用位点筛选

摘要：目的：寻找Skp2与Ku70蛋白相互作用位点。方法：1、通过脂质体转染，将表达野生型Ku70蛋白及4种变异型Ku70蛋白表达质粒及对照质粒分别转HEK293T细胞，获得表达载体。2、通过免疫共沉淀技术检测Skp2与Ku70蛋白结合部位。3、通过WesternBlot检测技术，确定Skp2与Ku70蛋白结合位点。结果：免疫沉淀显示C末端突变的Ku70蛋白样品中未检测出Skp2蛋白，只有在未缺失C末端端点的变异型Ku70蛋白样品中检测出Skp2蛋白，且将C末端第570和571位氨基酸突变后未检测出Skp2蛋白。结论：Ku70C末端第570和571位