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第二章第2节动物细胞工程第1课时:动物细胞培养
从社会中来谢晓晖,1977年出生,福建农林大学毕业。毕业后毫不犹豫地选择了入伍,最后也是被分配到了福建三明市的永安消防大队。在部队里谢晓晖表现良好,先后被任命为排长、作战参谋,并被授予了中尉军衔。2004年7月26日,一家中型民办蚊香厂突发火灾,救灾过程中导致谢晓晖重度烧伤,烧伤面积高达75%。在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。思考:如何用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?
1.概念:2.原理:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。细胞分裂(增殖)3.目的:获得细胞或细胞产物;不能获得完整动物个体一、动物细胞培养的概述
动物细胞培养实际上是在体外模拟体内的生理条件进行的培养,你认为体外培养动物细胞需要满足哪些条件?糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒环境适宜的温度、PH、渗透压适宜的气体环境动物细胞培养的条件营养条件其他条件二、动物细胞培养的条件【自主学习】阅读教材P43—44,思考并回答相关问题:任务一
1、根据动物细胞培养的概念初步构建动物细胞培养的流程2、在进行动物细胞培养时,你会选择胚胎或幼龄动物组织的细胞还是老龄动物组织的细胞作为培养材料?为什么?培养前为什么要将动物组织分散成单个细胞?3、常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?4、体外培养动物细胞有哪些类型?5、细胞培养一段时间,分裂会受阻,这是为什么?怎样解决这一问题?6、接触抑制、原代培养、传代培养的概念?7、传代培养如何收集细胞?8、胰蛋白酶两次处理的目的?阅读教材“动物细胞培养的过程”,思考、回答下列问题:二、动物细胞培养过程【合作探究】任务二
分瓶取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养传代培养放入CO2培养箱中培养三、动物细胞培养过程取动物组织制成细胞悬液转入培养液进行原代培养放入CO2培养箱中培养
一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。其细胞生命力旺盛,分化程度低,分裂能力强。取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理分散成单个细胞便于从培养液中获得营养,排出代谢废物,利于继续培养。细胞间的组要成分是蛋白质.胃蛋白酶不可以,pH不适宜2.在进行动物细胞培养时,你会选择胚胎或幼龄动物组织的细胞还是老龄动物组织的细胞作为培养材料?为什么?培养前为什么要将动物组织分散成单个细胞?3、常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?
制细胞悬液培养取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理加培养液4、体外培养动物细胞有哪些类型?①悬浮生长类:能够悬浮在培养液中生长增殖。②贴壁生长类:需要贴附于某些基质表面才能生长增殖(细胞贴壁),大多数细胞属于此类。细胞分裂受阻悬浮生长贴壁生长原因原因密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏等接触抑制解决办法在培养皿或培养瓶中5、细胞培养一段时间,分裂会受阻,这是为什么?怎样解决这一问题?密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏等,贴壁生长增殖还会出现接触抑制现象。传代培养
判断依据:是否分瓶!6、原代培养:传代培养:指动物组织经处理后的初次培养分瓶后的细胞培养。5、接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂二者如何区分?7、传代培养如何收集细胞?收集细胞①悬浮培养的细胞:②贴壁细胞:直接用离心法收集用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离下来,再用离心法收集取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理加培养液细胞分裂受阻悬浮生长原因密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏等接触抑制解决办法在培养皿或培养瓶中
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