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琼脂糖凝胶电泳分离核酸的原理聊城王辅明课件.pptx

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琼脂糖凝胶电泳分离核酸的原理琼脂糖是一种天然聚合长链状分子,可以形成具有刚性的滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应,这种效应的强弱与分子大小及构象有关,从而分出不同的区带。琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围

琼脂糖凝胶电泳分离核酸的原理对于分子量较大的样品(如大分子核酸、病毒等),一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低,但它制备容易,分离范围广,尤其适于分离大片段DNA。琼脂糖电泳的优点(1)琼脂糖凝胶含液体量大,可达98-99%,近似自由电泳,但是样品的扩散度比自由电泳小。(2)电泳速度快。(3)透明而不吸收紫外线,可以直接用紫外检测仪作定量测定。(4)样品易回收,常用于制备。

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