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01大肠杆菌乳糖操纵子的负调控021961,法国F.Jacob和J.Monod提出03乳糖操纵子学说(operonhypothesis).野生型乳糖操纵子(I+O+Z+Y+A+)的负调控作用1细胞中没有乳糖时,阻遏物连到操纵基因上,阻断转录,没有酶产生。2细胞中有乳糖时,乳糖与阻遏物连接,诱导转录,产生相应的酶。3相关突变体建立乳糖操纵子模型的相关实验分析Z+:能合成β-半乳糖苷酶Z-:不能合成β-半乳糖苷酶结构基因本身改变的突变体没有诱导物存在,也能进行酶合成的突变型。多发生在I基因和O基因上。组成型突变体贰壹叁01lacI-:该组成型突变使阻遏物发生改变,不能连到操纵基因区,结构基因总是处于开放状态。02lacOc:该组成型突变使操纵基因的DNA序列发生改变,不能与正常的阻遏物分子连接,结构基因处于转录状态。03超阻遏物突变体04突变株丧失合成结构基因产物的能力。05lacIs:该突变的效应与lacI-相反,产生的阻遏物分子不能与乳糖相互作用,而是连在操纵基因序列上,使结构基因转录关闭。部分二倍体分析将带调节基因的Fˊ导入E.coliF-细胞,构建不同组合的部分二倍体,比较在乳糖存在或没有乳糖时,野生型和突变型基因的活性。调节基因I的功能P328表14-11lac阻遏物的晶体结构分析阻遏物单体。阻遏物二聚体,连到两个21bp的操纵基因DNA片段。2调节基因I的功能及其产物分析1操纵基因序列的突变将导致阻遏物不能识别和结合到该部位上。从而造成乳糖利用物质继续合成。如何识别突变体Oc和I-。部分二倍体实验。操纵基因(O)的确定RNA聚合酶识别和结合部位:10区:序列特征5’-TATGTT-3’35区:序列特征5’-TTTACA-3’启动子2乳糖操纵子的正调控大肠杆菌的葡萄糖效应01色氨酸操纵子中基因表达时的衰减作用02色氨酸操纵子的结构03编码色氨酸合成相关的五个基因trpE,trpD,04TrpC,TrpB,trpA;在这五个结构基因上游有启动05区和操纵基因(trpO);在第一个结构基因trpE06和trpO之间,有一长达160bp的核苷酸序列,称为07前导序列(L),其中含一段衰减子(A)区段。
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