桑叶黄酮提取纯化、成分分析及抗氧化和抑菌活性研究.pdf

摘要

我国是种植桑树的第一大国，有着丰富的桑叶资源。桑叶中有很多活性成分，

比如黄酮、多糖、多酚等，具有抗癌、抗氧化、抗衰老等作用，是被国家批准的药

食两用的植物资源。黄酮类化合物作为桑叶中的主要成分之一，有着广泛的应用，

比如食品、化妆品、医药产物等领域。本研究便是以桑叶为研究对象，探究桑叶中

黄酮类化合物提取、纯化、成分分析以及体外活性，为桑叶资源的开发利用提供一

些数据支持。

1．以8、9、10三个月份的新鲜桑叶为材料，运用超声波辅助法比较了不同月

份黄酮含量的变化，发现黄酮含量9月份最高，其次是10月份。以9月份桑叶为材

料，考察了不同因素对黄酮提取量的影响，结合响应面法对提取工艺进行了优化，

确定了桑叶黄酮的最优提取工艺：提取时间为60min，提取温度为61℃，乙醇浓度

为58%，料液比为1：30g/mL，在此条件下桑叶黄酮的提取量为2.8615mg/g。

2．利用大孔树脂法进行桑叶黄酮的纯化，通过静态吸附解吸试验从AB-8、

D101、HPD100、HPD600四种不同型号的大孔树脂中筛选出AB-8为最适合桑叶黄

酮纯化的树脂型号。利用单因素法考查了不同因素对桑叶黄酮吸附解吸效果的影响，

在此基础上采用响应面法对纯化工艺进行优化。结果表明：最佳纯化工艺为上样量

为25mL，上样液流速为1mL/min，解吸液流速为1.8mL/min，解吸液浓度为90%，

该条件下黄酮回收率为74.8619%。

3．运用液相色谱—质谱联用（LC-MS）方法，对桑叶黄酮进行定性和定量分

析，以0.1%甲酸为流动相A，甲醇为流动相B，鉴定出了12种黄酮单体。根据含

量来确定桑叶黄酮主要成分有异槲皮苷、芦丁、黄芪苷，它们的含量分别为

19145.41μg/g、14517.05μg/g、9565.82μg/g。

4．采用清除DPPH、ABTS、羟基自由基的方法来检测桑叶黄酮类化合物的抗

氧化性，以Vc为阳性对照。结果表明：桑叶黄酮具有抗氧化能力；纯化后的黄酮

抗氧化能力明显高于纯化前。通过抑菌圈的方法发现黄酮对于大肠杆菌、沙门氏菌、

金黄色葡萄球菌均有抑制效果，对金黄色葡萄球菌的抑制效果最明显，其次是大肠

杆菌；黄酮纯化后其抑菌效果明显提高。

关键词：桑叶黄酮；提取；纯化；液质联用；体外活性

I

ABSTRACT

MulberrytreesarewidelycultivatedinChina,anditsleavesareusedasrawmaterials

forbothmedicineandfood.Therearemanyactiveingredientsinmulberryleaves,suchas

flavonoids,polysaccharides,polyphenols,etc.,whichhaveanti-cancer,anti-oxidation,anti-

agingandothereffects.Asoneofthemaincomponentsinmulberryleaves,flavonoidshave

awiderangeofapplications,infood,cosmetics,pharmaceuticalproductsandotherfields.

Thisstudytookmulberryleavesastheresearchobjecttoexploretheextraction,purification,

componentanalysisandinvitroactivityofflavonoidsinmulberryleaves,soastoprovide

somedatasupportforthedevelopmentandutilizationofmulberryleafresources.

1.Themacroporousresinmethodwasusedtopurifymulberryleaffla