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1997年,我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉。到2015年,我国已育成转基因抗虫棉新品种100多个,减少农药用量40万吨,增收节支社会经济效益450亿元。;3.2基因工程的基本操作程序;一、目的基因的筛选与获取;1.目的基因:;2.筛选目的基因;将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,结合质粒导入受体菌群体中储存,这个受体菌群就是该生物的基因文库。;一、目的基因的筛选与获取;一、目的基因的筛选与获取;3.获取目的基因;(聚合酶链式反应);一、目的基因的筛选与获取;引物为DNA聚合酶提供了游离的3’端,使DNA聚合酶从3’端延伸子链。;比较项目;PCR所用原料实为脱氧核苷三磷酸dNTP;;;;;思考:至少要经过几次循环才能分离出目的基因?;一、目的基因的筛选与获取;一、目的基因的筛选与获取;②每种引物内部不能发生局部碱基互补配对;5.一个DNA,通过PCR扩增n次:
①子代DNA分子数为:______个
②子代DNA分子中含模板链DNA分子数为:_____个
③复制过程中共需引物____________个(对)
④第n次复制需要引物_______个;一、目的基因的筛选与获取;一、目的基因的筛选与获取;二、基因表达载体的构建;二、基因表达载体的构建;二、基因表达载体的构建;二、基因表达载体的构建;二、基因表达载体的构建;二、基因表达载体的构建;习题巩固;二、基因表达载体的构建;使用一种DNA限制酶进行切割,是否只会得到目的基因与载体结合的这一种重组DNA?;某目基因两侧的DNA序列所含的限制酶酶切位点如图所示,下列可作该目的基因最佳载体的是()
;习题巩固;二、基因表达载体的构建;二、基因表达载体的构建;目的基因导入受体细胞之前,需构建基因表达载体,图甲、乙表示质粒及目的基因所在DNA片段,图中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
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