胰岛细胞特异性敲除基因appl1小鼠模型的制备.pdf

尊敬的《上海医学》编辑老师：

您好！首先非常感谢您及评审专家对我们文章的审修，目前已按照修改意见

进行了修改，以下是对修改意见的具体答复，希望回答专家的问题，谢谢。

1.“胰岛细胞特异性敲除APPL1基因”和“β细胞APPL1特异性敲除APPL1

基因”这两种表达方法应该统一；

在文章中已做修改。

2.从图3可以看出，β细胞APPL1敲除小鼠脂肪组织APPL1的表达显著高于野

生型，原因何在?

flox/floxKO

正如文章所提及，我们收集APPL1和β-APPL1两组小鼠多例样本，

western结果并未发现APPL1蛋白水平表达的脂肪组织中有统计学差异，为了消

除之前结果容易给人的误解，我们另外选择两组实验数据来作为结果图。

3.该研究目的是建立β细胞APPL1基因敲除小鼠模型，因此在表型分析方面应

多关注β细胞功能，至少要提供血胰岛素水平方面的数据，而不是仅仅提供血

糖数据。

这个意见提得很好，事实上我们研究组已经研究了APPL1flox/flox和β

KO

-APPL1小鼠的空腹血胰岛素水平差异，这部分内容我在文章的方法和结果中

也已作了修改和补充。

4.如可以请引用《上海医学》杂志和《中国实用内科杂志》的参考文献各一条

在文章中我已做补充。

此致

敬礼

李晓雯

2015.1．30

胰岛细胞特异性敲除基因APPL1小鼠模型的制备

1111211

李晓雯李羚林紫薇孙赟陈辰王琛*贾伟平

【摘要】目的制备转接蛋白APPL1胰岛细胞特异性敲除小鼠模型。方法采

用基因剔除打靶技术，囊胚显微注射法制备嵌合小鼠，利用Cre-loxp系统繁育

APPL1胰岛特异性敲除小鼠。Westernblot检测APPL1蛋白表达水平。结果成

功制备胰岛细胞特异性敲除基因APPL1小鼠模型，与APPL1flox/flox小鼠相比，

胰岛细胞特异性敲除基因APPL1并不影响小鼠体重，空腹血糖以及空腹胰岛素

水平，westernblot从蛋白水平印证敲除小鼠胰岛中的APPL1蛋白无表达。结论

胰岛细胞特异性敲除基因APPL1小鼠模型制备成功，为探讨APPL1在胰岛中的

功能提供研究工具。

【关键词】APPL1；胰岛；条件性敲除

11

EstablishmentofAPPL1conditionalknockoutmodelinmiceisletLIXiaowen,LILing,

1121*,1

LINZeiwei,SUNYun,CHENChen,WANGChenJIAWeiping.

1ShanghaiJiaoTongUniversityAffiliatedSixthPeople’sHospital,ShanghaiDiabetes

Institute,ShanghaiKeyLaboratoryofDiabetesMellitus,Shanghai200233,China

2ShanghaiResearchCenterforModelOrganisms,Shanghai201210,China

Correspondingauthor:WANGChen,wangchen@sjtu.edu.cn

【Abstract】ObjectiveTodiscussthem