DB32T 4368-2022 饲料中玉米赤霉烯酮的测定 时间分辨荧光免疫层析定量法　　.docxVIP

ICS65.120

CCSB46

32

江苏省地方标准

DB32/T4368—2022

饲料中玉米赤霉烯酮的测定时间分辨荧光免疫层析定量法

Determinationofzearalenoneinfeeds

Timeresolvedfluorescenceimmunochromatographyquantitativemethod

2022-09-06发布2022-10-06实施

江苏省市场监督管理局发布

目次

前言 III

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4原理 1

5试剂和材料 2

6仪器和设备 3

7样品制备 3

8样品前处理 3

9标准曲线制定 3

10检测过程 3

11结果计算 4

12方法性能 4

DB32/T4368—2022

III

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由江苏省畜牧业标准化技术委员会提出并归口。

本文件起草单位：江苏省家禽科学研究所、上海雄图生物科技有限公司。

本文件主要起草人：施寿荣、汪劲能、张鹏飞、肖蕴祺、胡艳、邵丹、沈一茹、张珊、王强。

DB32/T4368—2022

1

饲料中玉米赤霉烯酮的测定时间分辨荧光免疫层析定量法

1范围

本文件规定了饲料中玉米赤霉烯酮测定的原理、试剂和材料、仪器和设备、样品制备、样品前处理、标准曲线制定、检测过程、结果计算和方法性能。

本文件适用于饲料原料、浓缩饲料、配合饲料、精料补充料等试样中玉米赤霉烯酮的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样

GB/T20195动物饲料试样的制备

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

时间分辨荧光微球timeresolvedfluorescentmicrosphere

形状为球形，直径在几纳米至几十微米之间，微球表面或内部负载有荧光物质，在受到一定的能量激发时能够发出荧光的微粒，比普通荧光半衰期长。微球表面修饰有合适密度的羧基或其它功能基团，用于与蛋白或抗体的共价偶联；微球所包理的镧系稀土元素经过了鳌合，无需解离增强步骤。

3.2

时间分辨荧光免疫层析定量法timeresolvedfluorescenceimmunochromatography

quantitativemethod

用时间分辨荧光微球标记抗原或抗体制作层析试纸条，根据时间分辨荧光微球的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨的方法，可有效地排除非特异性荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。

4原理

试样中玉米赤霉烯酮与时间分辨荧光微球标记的特异性抗体结合后，抑制了层析过程中标记抗体与试纸条T线玉米赤霉烯酮抗原的免疫反应，使T线时间分辨荧光强度降低，质控线C线结合的荧光

2

DB32/T4368—2022

标记物浓度与样品中玉米赤霉烯酮的浓度无关。层析结束后，通过仪器检测计算试纸条T线和C线的时间分辨荧光强度比值和设定的标准曲线进行准确定量分析。

5试剂和材料

除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。

5.1十二水磷酸氢二钠(Na?HPO412H?O)。

5.2磷酸二氢钾(KH?PO?)。

5.3氯化钾(KCl)。

5.4氯化钠(NaCl)。

5.5盐酸(HCl)。

5.6甲醇(CH?OH)。

5.7蔗糖(C??H2?O)。

5.8吐温-20(CssH?O?6)。

5.9磷酸盐缓冲溶液：取2.178g磷酸氢二钠(5.1)、0.144g磷酸二氢钾(5.2)、0.12g氯化钾(5.3)、4.8g氯化钠(5.4),溶解于1L水中，用适量盐酸(5.5)调pH至6.8～7.2。

5.10提取液：取800mL