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中药复方“四神丸加减”对鸡白痢沙门菌感染雏鸡的治疗作用研究

鸡白痢是一种由鸡白痢沙门菌引起的传染病，能够影响各个年龄段的家禽。

特别是在雏鸡中，鸡白痢极易引起雏鸡的急性败血症，导致较高的发病率和死

亡率。尽管传统的抗生素在治疗鸡白痢上有明显效果，但是长时间使用可能会

引发鸡白痢沙门菌的耐药性，从而加速环境中耐抗生素细菌的产生，给食品安

全带来潜在风险。而中药属于天然药物，具有无污染、毒副作用小、残留毒物

量低等优点，本试验应用中兽医学辨证施治理论，将鸡白痢辨证为寒湿困脾泄

泻病症，因此选用了中药复方“四神丸”。中药复方“四神丸”始于《华佗神医

秘传》中的“华佗治肾泄神方”，含有补骨脂、肉豆蔻、吴茱萸、五味子等药材，

主要用于温肾散寒，涩肠止泻。而我们在此方的基础上，并且结合鸡白痢的临

床症状如排灰白色水样稀粪，呈现恶寒，羽毛蓬乱等特征，加入了白头翁、仙

鹤草、柴胡、桂枝、苍术、陈皮、厚朴、甘草，制作成中药复方“四神丸加减”

（SishenWanplusandminus，SSJ）应用于后续鸡白痢的临床研究。

本研究的目标是探究SSJ对鸡白痢沙门菌病的治疗效果。因此，首先从体

外探究SSJ对鸡白痢沙门菌的抑制作用。其次探究SSJ处理对感染雏鸡的治疗

作用以及对肠道菌群及其相关代谢产物的影响。最后，通过粪菌移植实验

（fecalmicrobiotatransplantation,FMT）探究SSJ对鸡白痢沙门菌病的治疗作用

能否通过调节肠道菌群及其代谢产物实现。这些研究结果将为SSJ在临床上治

疗鸡白痢沙门菌病提供理论依据。具体研究结果如下：

（1）采用微量肉汤稀释的方式，检测了SSJ在鸡白痢沙门菌上的最小抑菌

浓度（minimalinhibitoryconcentration,MIC）。结果发现，SSJ在鸡白痢沙门菌中

的MIC为250mg/mL。生长曲线测定结果显示，SSJ在1/2MIC和1/4MIC条件

下，细菌的生长显著受到抑制，而在1/16MIC及以下浓度，细菌的生长繁殖不

受影响，其生长曲线与对照组曲线接近重合。通过使用结晶紫染色法，研究了

SSJ对实验菌的生物被膜形成的效应。结果发现，SSJ在1/2MIC和1/4MIC条

件下能够有效地抑制生物被膜的形成，而在1/16MIC及以下无显著抑制作用。

最后，检测了SSJ处理后对鸡白痢沙门菌黏附侵袭鸡胚成纤维细胞DF-1的影响。

结果表明，SSJ在不影响鸡白痢沙门菌生长的浓度下，能显著抑制鸡白痢沙门菌

对鸡胚成纤维细胞DF-1的黏附侵袭能力。

（2）在体内实验中，使用不同浓度的鸡白痢沙门菌感染3日龄雏鸡，计算

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半数致死量（medianlethaldose,LD50）为2.2×10CFU/mL，后续实验用LD50感

染雏鸡。然后，分别使用0.4g/kg、0.8g/kg、1.6g/kg的SSJ和氟苯尼考治疗感

染雏鸡14d，并通过检测雏鸡死亡率、回肠的屏障相关紧密连接蛋白（ZO-1、

Occludin、Claudin-2和Claudin-1）、病理组织学（十二指肠、回肠和肝脏）、细

菌载量（脾脏、肝脏和盲肠）、血清中的免疫球蛋白（IgM、IgG和IgA）以及炎

性因子（IL-10、IL-8、IL-1β、TNF-α和IL-6）评估SSJ对鸡白痢沙门菌病的治

疗作用。结果发现，SSJ治疗显著降低鸡白痢沙门菌病的死亡率、抑制血清中促

炎因子的表达、减轻组织病理损伤、增加肠道屏障蛋白的表达、抑制细菌在外

周器官的定殖以及增加血清中的免疫球蛋白。

（3）然后，通过16SrRNA测序和代谢组学等技术，探究了SSJ对雏鸡肠

道菌群及其代谢产物的影响。结果显示，使用SSJ治疗后，其肠道菌群丰富度

和多样性相比于感染组显著增加，并且其增加了有益菌的数量，同时减少了有

害菌的数量。粪便代谢组学结果显示，与对照组相比，感染组的胆汁酸代谢通

路发生紊乱，而经1.6g/kgSSJ处理后，胆汁酸代谢通路以及代谢产物得到恢复，

并且显著增加了甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢通路中相关代谢产物。

（4）最后，将灌胃1.6g/kg的SSJ雏鸡的粪便菌群移植到鸡白痢沙门菌感