重组技术的基本工具讲课.ppt

要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？要切两个切口，产生四个黏性(平)末端。如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？会产生相同的黏性(平)末端，然后让两者的黏性(平)末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。思考?第28页，共50页，星期日，2025年，2月5日Goback……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……EcoRⅠ……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……不同来源的DNA片段混合将不同种来源的DNA片段连接起来生物A基因片段生物B基因片段……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……酶切第29页，共50页，星期日，2025年，2月5日1、作用:把DNA片段拼接成新的DNA，2、作用原理：催化磷酸二酯键形成,（不是氢键）二、DNA连接酶

——“分子缝合针”第30页，共50页，星期日，2025年，2月5日可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键第31页，共50页，星期日，2025年，2月5日T4DNA连接酶第32页，共50页，星期日，2025年，2月5日3、类型：E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源功能大肠杆菌T4噬菌体只能连接黏性末端能连接黏性末端和平末端第33页，共50页，星期日，2025年，2月5日寻根问底(P6)DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键作用对象DNA复制基因重租4、DNA连接酶与DNA聚合酶比较第34页，共50页，星期日，2025年，2月5日3、类型①E·coliDNA连接酶来源：大肠杆菌作用特点：只连接黏性末端②T4DNA连接酶来源：T4噬菌体作用特点：连接黏性末端和平末端2、作用原理：催化磷酸二酯键形成1、作用:：二、DNA连接酶把DNA片段拼接成新的DNA，笔记第35页，共50页，星期日，2025年，2月5日第1页，共50页，星期日，2025年，2月5日你还记得我们吗？氢键磷酸二酯键DNA聚合酶限制性内切酶DNA连接酶运载体第2页，共50页，星期日，2025年，2月5日第3页，共50页，星期日，2025年，2月5日专题1.基因工程的基本内容基因工程的概念1.1基因工程的基本工具1.2基因工程的基本操作程序基因工程的发展史1.3基因工程的应用1.4蛋白质工程的崛起第4页，共50页，星期日，2025年，2月5日基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。第5页，共50页，星期日，2025年，2月5日别名：操作环境：原理：操作水平：结果：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因重组DNA分子水平定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。第6页，共50页，星期日，2025年，2月5日基因工程的产物第7页，共50页，星期日，2025年，2月5日第8页，共50页，星期日，2025年，2月5日这就要用到定向改造生物的新技术——基因工程第9页，共50页，星期日，2025年，2月5日基因工程的概念基因工程的发展史（自学了解）第10页，共50页，星期日，2025年，2月5日普通棉花抗虫棉第11页，共50页，星期日，2025年，2月5日基因工程培育抗虫棉的简要过程：普通棉花(无抗虫基因)苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因与运载体DNA拼接导入棉花细胞(含抗虫基因)转基因棉花植株上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？第12页，共50页，星