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观察pH对酶促反应速度的影响,通常为一“钟形”曲线,即pH过高或过低均可导致酶催化活性的下降。酶催化活性最高时溶液的pH值就称为酶的最适pH(optimumpH)。四、pH对酶促反应速度的影响第63页,共98页,星期日,2025年,2月5日567891011最适pHRelativeActivity第64页,共98页,星期日,2025年,2月5日第65页,共98页,星期日,2025年,2月5日人体内大多数酶的最适pH在6.5~8.0之间。酶的最适pH不是酶的特征性常数,与酶的性质、底物和缓冲体系有关。pH对酶促反应速度的影响,其原因主要是由于pH的改变导致了酶的催化基团以及底物分子的解离状态改变或者导致了酶蛋白的变性。第66页,共98页,星期日,2025年,2月5日一些酶的最适pH值酶最适pH胃蛋白酶1.8过氧化氢酶7.6胰蛋白酶7.7延胡索酸酶7.8核糖核酸酶7.8精氨酸酶9.8碱性磷酸酶10.5第67页,共98页,星期日,2025年,2月5日问题:(1)???Km越小,底物亲和力越大(X)(2)???Ks越小,底物亲和力越大(√)(3)?天然底物就是亲和力最大的底物(X)(4)???天然底物就是Km值最小的底物(√)(5)底物亲和力越大酶促反应速度越大(X)(6)对于不同的酶或同一种酶的不同底物,Km越小反应速度越大(X)第68页,共98页,星期日,2025年,2月5日酶的抑制作用有些物质能与酶分子上某些必须基团结合(作用),使酶的活性中心的化学性质发生改变,导致酶活力下降或丧失。失活作用凡可使酶蛋白变性而引起酶活力丧失的作用。抑制剂凡是能降低酶促反应速度,但不引起酶分子变性失活的物质统称为酶的抑制剂(inhibitor)。五、抑制剂对反应速度的影响第69页,共98页,星期日,2025年,2月5日酶的抑制与变性的区别:抑制剂对酶的抑制作用有选择性,而蛋白质变性剂可使所有的酶变性失活。酶抑制剂一般都具有以下特点:一方面在化学结构上与被抑制酶的底物分子或底物的过渡态相似。另一方面能够与酶的活性中心以非共价键或共价的方式形成比较稳定的复合体或结合物,而变性剂则作用方式较多。第70页,共98页,星期日,2025年,2月5日(一)不可逆抑制(irreversibleinhibition)不可逆抑制:抑制剂与酶分子的必需基团共价结合,使酶丧失活性,不能采用透析超滤等物理方法除去抑制剂使酶恢复活性。[E]?[I]第71页,共98页,星期日,2025年,2月5日1、巯基酶抑制剂抑制剂:重金属离子Ag+、Hg2+、砷剂等,以丝氨酸侧链上的羟基为必需基团的酶巯基酶失活的酶分子第72页,共98页,星期日,2025年,2月5日SEHg+SCOONaCHSHCHSHCOONaSHE+HgSHCOONaCHSCHSCOONa二巯基丁二酸钠解毒方法:第73页,共98页,星期日,2025年,2月5日2、羟基酶抑制羟基酶指有丝氨酸残基侧链上的羟基为必需基团的一类酶。抑制剂:有机磷杀虫剂,如:敌百虫、敌敌畏、对硫磷等。解毒------解磷定(PAM)丝氨酸酶第74页,共98页,星期日,2025年,2月5日乙酰胆碱+H2O胆碱+乙酸胆碱酯酶有机磷杀虫剂×胆碱能神经兴奋↑中毒(心跳变慢、瞳孔缩小、流涎、多汗、呼吸困难)第75页,共98页,星期日,2025年,2月5日3.自杀底物(suicidesubstrate)底物在酶催化作用下所形成的反应中间物或最终产物,可以共价修饰酶活性部位的必需基团从而导致酶不可逆失活。第76页,共98页,星期日,2025年,2月5日(1)天然酶的自杀底物AckeeBlighiasapida植物——未成熟果实的假种皮中含有一种有毒的降糖氨酸(即甲叉环丙基丙氨酸)第77页,共98页,星期日,2025年,2月5日(2)治疗用人工合成的酶自杀底物治疗高血
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