12DNA的复制修复与重组DNA技术公开课一等奖课件省赛课获奖课件.pptxVIP

第十二章DNA的复制、修复与重组;转录;分子生物学中心法则(centraldogma)

1958年Crick

1970年Temin和Baltimore

DNARNA蛋白质

;第一节DNA复制的原则;一、半保存复制;二、半不持续复制;前导链(leadingstrand)：

在引物的3`端按5`→3`方向持续不停地合成的DNA链。

随从链(laggingstrand)：

在引物的3`端按5`→3`方向不持续合成的DNA链。

冈崎片段

（Okazakifragment）：

后随链上不持续合成的1000～2000或100～200个核苷酸构成的DNA小片段。;三、RNA引物;第二节参加DNA复制的某些酶类和蛋白质;罗杰.科恩伯格接受父亲（左）的祝贺;5`→3`外切酶活性;3`→5`外切酶活性;DNA聚合酶Ⅰ多功效酶;2、DNA聚合酶Ⅱ

活性：5`→3`聚合酶活性

3`→5`外切酶活性

功效：不确切

;3、DNA聚合酶Ⅲ;功效：α亚基—5`→3`聚合

ε亚基—3`→5`外切

τ亚基—连接

γ2δδ`χψ亚基复合物—钳夹

β亚基—钳夹、滑动

;二、真核生物的DNA聚合酶;三、解链、解旋酶类和蛋白质（大肠杆菌E.coli）;DNA拓扑异构酶Ⅰ功效：临时切断双链中的一股，

另一股链旋转通过该缺口，

张力下降后，再连接缺口;4、引发体;5、连接酶;第三节DNA复制过程（大肠埃希菌）;一、复制的起始;;单链结合蛋白：;2、复制方向;二、复制的延长;复制叉前进;二、复制的终止;5`;2、端粒酶：避免端粒缩短的一种逆转录酶

构成：由RNA和蛋白质构成

蛋白质—DNA聚合酶RNA—模板

唯一携带RNA模板的逆转录酶

功效：复制端粒序列，避免端粒缩短。

;机制：;;;第四节DNA的损伤与修复;二、DNA损伤的类型;2、缺失

一种核苷酸、一段核苷酸、一种基因

Lesch-Nyhan`s综合症

次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）基因丢失;二、DNA损伤的修复机制;②AP特异的核酸内切酶;①切割错误碱基→②切割3`5`磷酸二酯键→③切除、弥补→④连接;为什么构成DNA是ATCG，而构成RNA是AUCG？;复制的真实性;第五节重组DNA技术;3、重组DNA技术的基本环节;（1）重组分子的构建（接）;载体