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软骨素
硫酸乙酰肝素
一、化学结构分析
多糖分子是由糖苷键连接不同单糖分子形成的线性或有支链的链状结构
单糖组成不同
糖苷键连接方式和位置的不同
分子量的不同
黏度法
采用毛细管黏度计测定多糖样品的特性黏度,再利用马克一霍温克方程求得分子量。
其中K和a被称为马克-霍温克参数,与聚合物种类,溶剂种类和温度有关。对于给定温度下的某种聚合物溶液,在一定分子量范围内,K和a是与分子量无关的常数。
此方法所需测量设备简单、操作容易,所测得分子量在20000-200000之间,称为黏均分子量。
(二)分子量测定
高效液相色谱法
高效液相色谱技术中的凝胶排阻色谱法(分子排阻色谱法)可用于多糖分子量的测定。根据所测样品的分子量大小选择一定排阻范围的专用凝胶柱,采用示差折光检测器进行检测。
(二)分子量测定
电泳法
此法所需样品量小、分析速度较快且可同时分析多个样品。对于带有电荷的多糖可直接进行电泳分析,而不带电荷的多糖也可通过酸性荧光标记试剂衍生后进行电泳分析。将待测样品与已知分子量的一系列标准品的电泳结果进行比对,可得出待测样品的分子量。
(二)分子量测定
质谱法
质谱技术的基本原理是样品分子离子化后,根据不同离子间质量与所带电荷比(m/z)的差异来分离并确定分子量,是目前测定分子量最精确的方法。与前述方法相比,质谱法具有测定精度高、分析所需样品量少、仪器操作高度自动化等优点。
(二)分子量测定
光散射法
光束通过介质时会在入射光束方向以外的方向观察到光的散射,当光束照射多糖溶液时,可根据在规定角度处所测得的散射光与入射光强的关系公式推算出多糖的分子量。
常用的激光小角光散射仪利用激光的高准直性和高强度,测定时可采用稀溶液,且无需对浓度和角度外推,具有测定速度快且精度高的特点。此法检测所得的分子量为重均分子量。测量范围在10~10000kDa
(二)分子量测定
膜渗透压法
一定浓度溶液的渗透压具有溶质依数性,在多糖水溶液和水溶液之间设置一个只允许水分子自由通过的半透膜,测定渗透压并利用渗透压与多糖溶液中多糖分子数的关系公式可推算出多糖的分子量。
此法检测所得分子量是数均分子量,测量范围在30~1500kDa
(二)分子量测定
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