动物体细胞克隆职业教育医学生物技术专业教学课件.pptx

职业教育医学生物技术专业教学资源库动物体细胞克隆

职业教育医学生物技术专业教学资源库由于体细胞克隆产生的动物不经过雌雄配子结合阶段，因此又被称为无性生殖。1996年世界首例体细胞克隆动物——绵羊“Dolly”的诞生，越来越多科学家纷纷投入到体细胞克隆这一研究领域。体细胞克隆技术不仅仅在保护优良品质及濒危物种中具有潜在的广泛的应用前景，更将在生物医学及动物生殖发育的基础理论研究中发挥巨大的作用。

职业教育医学生物技术专业教学资源库2动物克隆技术与遗传育种0301体细胞克隆的相关概念02体细胞克隆的分子机理体细胞克隆的应用前景

职业教育医学生物技术专业教学资源库LOREMIPSUMDOLOR01体细胞克隆的相关概念

职业教育医学生物技术专业教学资源库体细胞克隆又称体细胞核移植，是指利用一定的设备和技术手段，将动物的体细胞移入到去核的成熟卵母细胞内，形成一个新的体外重组胚胎，然后再于特定的发育时期将重组胚胎移植到代孕母体的子宫内，完成发育，生产与体细胞供体核遗传上同质后代的过程。

职业教育医学生物技术专业教学资源库克隆1.1克隆：克隆是对英文单词“clone”的音译。广义而言，克隆可以理解为复制和拷贝。在DNA水平上，DNA的克隆即是将一段DNA片段通过酶切、连接等DNA重组技术连接到可以在宿主细胞中(通常是大肠杆菌)进行自我复制的载体上，然后通过宿主细胞的繁殖以及载体在宿主细胞中的自我复制获得大量目的DNA片段。

职业教育医学生物技术专业教学资源库克隆1.1克隆：在细胞水平上，细胞克隆是由一个细胞在体外的培养液中分裂若干代所形成的一个遗传背景完全相同的细胞集体。在个体水平上，克隆是用一些特殊的设备和技术获得一群遗传背景即基因完全一致的个体。

职业教育医学生物技术专业教学资源库核移植1.2核移植：利用显微操作技术将供体细胞核(含有完整基因组的细胞核)移植到去除细胞核的卵母细胞中并在体外条件下形成重组胚胎的过程。在形成的重组胚胎中，基因组DNA完全来自于供体细胞的细胞核，因为作为受体的卵母细胞的细胞核在操作过程中已被提前去除掉。

职业教育医学生物技术专业教学资源库在一定程度上，核移植等同于克隆。对大多数哺乳动物而言，在实际操作中，为方便操作，通常用整个供体细胞代替供体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中。因为大多数哺乳动物的细胞核非常小，通常难以操作，而卵母细胞的细胞核除外。

职业教育医学生物技术专业教学资源库核供体和核受体1.3核供体：提供完整基因组的细胞，可以是胚胎细胞或不同细胞类型的体细胞。根据核供体细胞的类型，克隆可以分为胚胎细胞克隆和体细胞克隆。核受体：核受体通常指去除细胞核的卵母细胞。根据核供体和核受体是否来自同一物种，克隆又可分为同种克隆和异种克隆。如没有明确指出异种克隆，体细胞克隆通常指同种克隆。

职业教育医学生物技术专业教学资源库LOREMIPSUMDOLOR2.体细胞克隆的分子机理

职业教育医学生物技术专业教学资源库2.1供体细胞核重构细胞核重构是一个DNA重新包装导致染色质的空间结构发生了变化的物理过程，供体细胞核的重构不充分将会影响克隆胚胎整个的后期发育。衡量细胞核结构重构的方法有很多，包括供体细胞核移植到去核卵母细胞胞质后总体的结构变化、体细胞核膨胀到类似原核的大小以及重新形成紧密的核仁。在体细胞克隆中，供体细胞核与受体细胞质之间的物质交换是保证供体核重构的条件。

职业教育医学生物技术专业教学资源库2.2卵母细胞的激活受精是精子与卵母细胞质膜相互作用的一系列过程，精子穿透卵丘层和透明带与卵母细胞质膜发生反应。受精后，卵母细胞质膜启动一个信号使卵母细胞转变成新的二倍体胚胎。这一过程称为卵母细胞激活。卵母细胞激活包括大量形态学和生物学的变化，一些变化发生在精子与卵母细胞质膜反应后的几秒或几分钟内，而另一些变化发生可能要持续几个小时，卵母细胞激活发生的一系列反应是胚胎发育所必需的。

职业教育医学生物技术专业教学资源库2.2卵母细胞的激活大多数哺乳动物的成熟卵母细胞由于促成熟因子(maturationpromotionfactor,MFP)的存在，都停滞于减数分裂Ⅱ期。

职业教育医学生物技术专业教学资源库2.2卵母细胞的激活减数分裂Ⅱ期卵母细胞受精后在精子刺激下发生活化，呈现细胞质内Ca2+浓度升高、MFP活性快速降低、卵母细胞减数分裂恢复、核膜破裂、染色体凝集、细胞骨架重构、细胞形态变化等。Ca2+浓度升高是卵母细胞激活重要的诱导信号。体细胞克隆过程中，卵母细胞的激活是供体核与受体细胞质