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这种分类方法叫直方图分类法。计数器直方图分类与人工染色显微镜分类比较,相关系数为:LY>0.9,MO=0.7,GR>0.9,正常细胞分类的可信度达95%,不需人工复查。白细胞直方图除显示分类外,还显示4个报警区域,如果某个报警区域里的计数值异常增多,就在此区域出现“R”报警:R1为直方图上淋巴峰左侧区域有异常,可能有血小板凝块、巨大血小板、有核红细胞、不溶性红细胞和冷凝集素等因素的影响;R2为直方图上淋巴峰和单核峰之间的区域有异常,可能有异型淋巴细胞、幼稚淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性细胞或嗜碱性细胞等因素的影响;R3为直方图上单核峰和中性粒峰之间的区域有异常,可能有不成熟粒细胞、嗜酸性细胞等因素的影响;R4为直方图上中性粒峰右侧区域有异常,粒细胞数量过多;RM为以上区域2个或2个以上同时有异常。分类报警的实验前因素有:试剂污染、试剂不配套、样品没有混匀、血样存放时间太长和电噪声等。定量原理定量装置是为了对一定容积的血细胞进行计数而设计的,可确保被计量样品液容积的精度。定量原理定量装置是为了对一定容积的血细胞进行计数而设计的,可确保被计量样品液容积的精度。定量装置分类:定量装置可分为有水银压力计式和无水银的光电检测式2种。前者系早期产品,由于水银的挥发性和毒性,使用不当易造成污染和公害。80年代后逐渐采用光电检测式定量装置。光电检测式定量装置常用的有多种形式,图1-6是其中的一种定量装置中的特殊部件:定量装置中的特殊部件主要有负压泵、压力调节器和废液瓶。计数时,样品液在负压吸引下通过小孔进入小孔管。当液面沿管路上升到P3点时,弯曲的液面使发光管发出的光线折射,电检测器便产生一个脉冲信号去控制电路令计数开始;当液面上升到P1点时,又产生一个脉冲信号令计数停止。P1和P3之间的容量便等于进入小孔管被计数的样品液容量。负压泵:是管路系统中的动力部件,样品液、电解液、清洗液等均靠负压抽吸流动。在计数时,尤其要求稳定而适当的负压以避免计数误差。负压泵常以电磁感应原理为设计基础,故又称为电磁泵。结构有多种种形式。图1-7是其中的一种图1-7它由电磁铁、永久磁铁、气囊等组成。波纹管的左端有一块永久磁铁,永久磁铁左边是电磁铁。当电磁铁的极性与永久磁铁的极性相反时,便对永久磁铁产生吸力,即将永久磁铁吸引过去。永久磁铁带动波纹管舒张,使得进气阀打开,排气阀门关闭,波纹管向气囊内抽气。当电磁铁的极性和永久磁铁的极性相同时,在电磁铁的排斥和波纹管本身收缩力作用下,气囊压缩,使排气阀门打开,进气阀门关闭,抽进气囊里的气体被排出去。由以上工作原理可知,当抽气口接负压瓶时,便可以组成负压泵;当排气口接压力瓶时,它便成为正压泵。压力调节器各种细胞计数器所需要的最佳负压范围有所不同,即使同一台仪器因使用环境不同,管路状况不同也可能造成负压偏离,因此需要负压调节器给予一定的调节。常见的负压调节器有手动和自动式2种。自动式压力调节器之一的工作原理如图1-8所示。1只压敏电阻和一只可调电阻与2只普通电阻构成桥式电路的4只臂,其中压敏电阻与负压相通作为工作臂,可调电阻用以调节负压的大小。当电桥平衡时R1/R2=R3/R4,桥路不输出信号(即输出为零电平)。当负压变化时,R1的阻值发生变化,桥路失衡,将有信号输出。这个信号可正可负,接到控制电路后便将负压控制在额定范围之内。废液瓶废液瓶的作用有3,一是使负压泵产生的压力通过它作用到小孔管内的液体上;二是对负压泵产生的负压有缓冲作用;三是存贮废液,不让废液进人负压泵。如图1-9所示。废液瓶可用玻璃或塑料制成,瓶盖和瓶体需紧密接触,因为废液瓶是负压的容器,气密不良便不能正常工作。瓶盖上有2根管子,分别连接定量管和负压泵。瓶盖上还设计了废液报警装置。当废液将满时,浮动开关上浮,驱动报警信号灯闪烁。当废液报警时,操作者必须及时将废液倒掉,否则将可能损坏泵体。有的机器具有自锁功能,即废液瓶将满时不但发出警告信号,而且锁住机器不能进行任何操作。计数器上的一些重要技术为保证计数的准确性,许多计数器应用了以下重要技术。燃烧电路:该电路能灼烧小孔,自动清洁屯积在计数孔的蛋白质,防止计数孔堵塞。重合损失补偿:细胞计数时,理想状态是让细胞一个个地通过宝石微孔。但是红细胞直径平均为7-10μm,白细胞直径平均为25μm左右,而微孔直径有75-100μm。实际计数时会有2个或2个以上的细胞重叠一起进入小孔“感应区”,这种情况产生的脉冲幅度会比单个细胞要高,但只能产生一个信号脉冲,使计数有所丢失,也即计数假性降低而体积会假性升高,这种现象称为重合损失。出现重叠的概率与细胞浓度、液体流速和孔径有关,为了弥补这种损失,电路中设有重合校正电路或用软件校正。通常是按伯桑(Poisson)分布规率

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