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三、真核生物RNA的合成二、原核生物RNA的合成一、转录的基本规律和体系本章概要RNA的生物合成职业教育医学生物技术专业教学资源库四、真核生物RNA转录后的加工
转录的起始转录的延伸转录的终止0203原核生物RNA的生物合成目录01
转录起始需解决的两个问题:RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。DNA双链解开,使其中的一条链作为转录的模板。职业教育医学生物技术专业教学资源库(一)转录的起始
职业教育医学生物技术专业教学资源库转录起始过程:1.RNA聚合酶全酶(?2????ω)与模板启动子识别结合,形成闭合转录复合体(closedtranscriptioncomplex);2.DNA双链局部解开,形成开放转录复合体(opentranscriptioncomplex);3.在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应,形成转录起始复合物:5?-pppG-OH+NTP?5?-pppGpN-OH3?+ppi转录起始复合物:(一)转录的起始RNApol(?2????ω)-DNA-pppGpN-OH3?
第一个磷酸二酯键生成后,σ亚基即从转录起始复合物上脱落,核心酶连同四磷酸二核苷,继续结合于DNA模板上,核心酶沿DNA链前移,进入延长阶段。在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长。(NMP)n+NTP??(NMP)n+1+PPi职业教育医学生物技术专业教学资源库(二)转录的延伸
(二)转录的延伸:职业教育医学生物技术专业教学资源库转录泡:在转录延伸过程中,DNA双链解开10~20bp,形成局部单链区像一个小泡,称为转录泡。转录泡是由RNA聚合酶核心酶、DNA模板链以及转录形成的RNA新链三者结合形成的转录复合物。转录过程中,转录方向(解链方向)与RNA合成方向一致,合成方向是5’→3’,模板的方向是3’→5’,由于AU配对的稳定性小于AT配对,因此合成的RNA的5’端是游离的。
(二)转录的延伸原核生物转录过程中的羽毛状现象:原核生物的基因组小,为提高转录效率,在同一DNA模板上,有多个转录同时在进行;由于原核生物没有核膜结构,转录尚未完成,翻译已在进行。职业教育医学生物技术专业教学资源库
(三)转录的终止:转录终止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进,转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。原核生物转录终止,依据是否需要蛋白质因子的参与,分为依赖ρ(Rho)因子与非依赖ρ因子转录终止两大类。职业教育医学生物技术专业教学资源库
1.依赖ρ(Rho)因子转录终止:ρ因子是由相同亚基组成的六聚体蛋白质,亚基分子量46kD。ρ因子能结合RNA,又以对polyC的结合力最强。ρ因子还有ATP酶活性和解螺旋酶(helicase)的活性。职业教育医学生物技术专业教学资源库ρ因子终止转录的作用是:与RNA转录产物结合,结合后ρ因子和RNA聚合酶都可发生构象变化,从而使RNA聚合酶停顿,解螺旋酶的活性使DNA/RNA杂化双链拆离,利于产物从转录复合物中释放。
2.非依赖ρ(Rho)因子转录终止:DNA模板上靠近终止处,有些特殊的碱基序列(富含GC区),转录出RNA后,RNA产物形成特殊的发卡结构,改变RNA聚合酶的构象来终止转录。职业教育医学生物技术专业教学资源库
职业教育医学生物技术专业教学资源库5′pppG5?3?3?5?RNA-pol茎环结构使转录终止的机理:使RNA聚合酶变构,转录停顿;使转录复合物趋于解离,RNA产物释放。
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