2025年高考生物答题技巧与模板构建专题10 生物技术工程（原卷版）.pdfVIP

专题10生物技术工程

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模板01酶切位点的选择-既要相同又要不同

模板02双标记筛选金标准—二去其一是为真

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命题点真题在线常见设问关键词

微生物的选

2023·山东·T152023·广东·T102023·北京·T162022·全国甲·T37

择培养和计

2022·全国乙·T372022·广东·T212021·江苏·T18

数

2023·广东·T122023·江苏·T132023·浙江1月选考·T242021·福

植物体细胞

建·T11

杂交技术

2020·北京·T132020·山东·T13

2023·北京·T12

动物细胞融

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合和单克隆设问关键词：限制酶

建·T13

抗体的制备的选择、目的基因的

2021·山东·T152021·江苏·T112020·全国Ⅰ·T38

鉴定、PCR过程

基因工程的2023·全国乙·T382023·全国甲·T382023·湖北·T42023·广

基本操作程东·T20

序2021·广东·T22

DNA片段的

2023·江苏·T222023·山东·T252023·浙江6月选考·T192022·辽

扩增与电泳

宁·T122022·江苏·T242021·山东·T252021·全国甲·T38

鉴定

几种不同2023·江苏·T222023·山东·T252022·江苏·T242022·山东·T25

PCR的应用2021·全国甲·T382021·山东·T252020·北京·T122020·江苏·T33

命题预测基因表达载体的构建；标记基因的选择

目的基因和载体的酶切和连接是设计的核心；根据题目的具体信息判断保留和破坏的标记基

关键技巧

因的类型

模板01酶切位点的选择-既要相同又要不同

【核心】相同黏性末端，正确连接方向

酶切位点的选择实际上有许多需要考虑的逻辑，但核心点是两个：

要保证质粒和目的基因的黏性末端相同，才能让质粒和目的基因的黏性末端相互连接。

要保证基因的头对着启动子，尾对着终止子，才能保证正确的转录。

除这两个原则之外，很多题目还会有额外的信息，如基因中间或质粒其他位置存在相同酶切位点、同尾酶

等，要根据题目信息具体判断。

【基本知识】

1(“”)

（）限制性内切核酸酶简称限制酶

2

（）限制酶的选择

1.PstSma

不破坏目的基因原则：如图甲中可选择Ⅰ，而不选择Ⅰ。

2.保留标记基因、启动子、终止子、复制原点原则：质粒作为载体必须具备标记基因，所选择的限制酶尽量

不要破坏这些结构，如图乙中不选择SmaⅠ。若载体上有两个及以上的标记基因，则可合理对其中一些标