基于MOMP探求左归丸对力竭运动大鼠骨骼肌细胞的保护作用.pdf

摘要

目的：骨骼肌细胞的凋亡与焦亡是运动训练中可能的损害形式之一，而线粒

体作为细胞死亡不可忽略的关键因素，能否保持稳态成为衡量运动疲劳或损伤的

重要指标。学界内研究表明中药有大量成分可以调节机体状态并对机体有显著保

护作用，左归丸可以在抗氧化、维持机体功能等方面起到积极作用，但在运动领

域研究尚不深入，对运动性疲劳、损害的调节机制暂不明确。本文选取了左归丸

给药进行干预，以探究左归丸对重复力竭运动大鼠运动能力的影响、对骨骼肌线

粒体外膜通透性(MOMP)改变的调节作用及左归丸对线粒体异常所致细胞凋亡

与焦亡的抑制作用，进而为左归丸改善线粒体功能，对骨骼肌细胞运动损害保护

作用的应用领域提供一定的理论依据。

方法：将50只成年雄性SD大鼠每组10只随机分为空白对照组(C)、力竭运

动对照组(E)、左归丸低(ZLE)、中(ZME)、高(ZHE)三个剂量的力竭运动组。适应

性游泳三天后，负重(4%自身体重)力竭游泳，4天1休，为期30天，C、E组灌

胃生理盐水，ZLE、ZME、ZHE组分别灌胃2g/(kg·d)、4g/(kg·d)、8g/(kg·d)。末

次力竭运动结束后即刻取材检测，制作石蜡切片分别进行HE染色与TUNEL染

色光镜下观察其显微结构；生化法检测血清CK、LDH浓度；RT-qPCR法与

WesternBlot法分别检测Caspase-4、Caspase-9、Caspase-11、PARP1、GSDMD、

Cytc、Mfn-1、Fis-1、VDAC、Bcl-2、Bcl-XL、Bax、Bak的蛋白及基因表达。

结果：(1)力竭游泳运动大鼠运动能力变化：与大鼠首次力竭游泳时长相比，

ZLE、ZME、ZHE组末次力竭游泳时长相较于同组均有显著性差异(p0.01)。与

末次E组游泳时长的增长幅度相比，ZHE组增长幅度最为显著(p0.01)。此外，

ZLE与ZME组力竭游泳时长增长幅度也有明显增加(p0.05)。将ZLE与ZME、

ZHE进行比较，也都具有显著性(p0.05)。

(2)大鼠血清LDH、CK生化检测结果：LDH活性C、E组之间无明显差异，

ZHM组组内表达最高(p0.001)。CK的活性与C组相比，E、ZLE、ZME、ZHE

显著提高(p0.01)，E、ZLE、ZME、ZHE组组间比较活性逐渐降低且组间差异

具有显著性(p0.05)。

(3)大鼠骨骼肌形态结构与病理状态：HE染色切片观察显示C组大鼠骨骼肌

细胞形态结构完整，肌纤维排列清晰、紧密均匀且无断裂现象发生；E组大鼠骨

I

骼肌细胞有破裂融合现象发生，肌纤维排列紊乱，偶有断裂现象发生；与E组

相比，ZLE组无明显差异，ZME、ZHE组有显著改善；TUNEL切片观察显示相

比C组，正常细胞核数量E、ZLE、ZME、ZHE组显著减少(p0.01)，E、ZLE、

ZME、ZHE组组间相比数量依次显著减少(p0.05)；

(4)大鼠骨骼肌Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bak、caspase-3、VDACRT-qPCR检测

结果：Bcl-2、Bcl-xl、VDAC基因表达相似，与C组相比，E、ZLE、ZME组明

显降低(p0.05)，E、ZME、ZHE组间相比表达逐渐升高且有显著差异(p0.05)；

Bax、Bak基因表达与Bcl-2、Bcl-xl、caspase-3的基因表达相似，与C组相比，

E、ZLE、ZME、ZHE组显著提升(p0.01)，E、ZME、ZHE组间相比表达逐渐

降低并由显著差异(p0.01)。

(5)大鼠骨骼肌Mfn-1、Fis-1、caspase-9、caspase-4、caspase-11、Cytc、PARP1、

GSDMDWB检测结果：Mfn-1蛋白表达与C组相比，E组极显著降低(p0.001)

其余组显著升高(p0.05)，E、ZLE、ZME、ZHE组蛋白表