细胞生物学实验流程及相关试剂仪器概述教学课件.ppt

细胞生物学实验流程及相关试剂仪器概述;课程目标：掌握细胞生物学实验基本原理与操作;细胞培养基础：培养基的选择与配制;无菌操作的重要性与规范;细胞计数：血球计数板的使用方法;细胞活力检测：台盼蓝染色原理与步骤;细胞冻存与复苏：保护剂的选择与流程;细胞融合技术：PEG诱导细胞融合原理;细胞转染方法：瞬时转染与稳定转染;质粒DNA的提取与纯化;RNA提取：Trizol法原理与操作;反转录PCR：cDNA合成的步骤;实时荧光定量PCR：原理与应用;蛋白质提取：细胞裂解方法;蛋白质定量：Bradford法原理与步骤;SDS凝胶电泳：蛋白质分离原理;WesternBlot：蛋白质免疫印迹流程;免疫荧光染色：抗体选择与孵育;共聚焦显微镜：成像原理与应用;流式细胞术：细胞分选与分析;ELISA：酶联免疫吸附实验原理;细胞凋亡检测：AnnexinV-FITC染色;细胞周期分析：PI染色原理与步骤;细胞迁移实验：Transwell小室法;细胞侵袭实验：Matrigel基质胶的应用;细胞划痕实验：观察细胞迁移速度;常用试剂：PBS缓冲液配制;常用试剂：胰蛋白酶消化细胞;常用试剂：DMSO的用途与注意事项;常用试剂：抗生素的选择与使用;常用试剂：血清的种类与作用;常用仪器：超净工作台操作规范;常用仪器：二氧化碳培养箱使用维护;常用仪器：倒置显微镜观察细胞形态;常用仪器：高速离心机使用注意事项;常用仪器：PCR仪参数设置;实验安全：生物安全等级划分;实验安全：化学试剂安全操作;实验安全：废弃物处理规范;实验记录：实验日志书写规范;实验设计：对照组设置的重要性;实验数据分析：统计学方法应用;实验结果展示：图表制作技巧;细胞生物学研究热点：肿瘤微环境;细胞生物学研究热点：干细胞研究;细胞生物学研究热点：免疫细胞治疗;案例分析：药物筛选实验设计;案例分析：基因敲除细胞构建;案例分析：细胞信号通路研究;细胞生物学前沿技术：CRISPR-Cas9基因编辑;细胞生物学前沿技术：单细胞测序;细胞生物学前沿技术：类器官培养;细胞生物学资源：细胞库介绍;细胞生物学资源：常用数据库检索;实验常见问题：细胞污染预防;实验常见问题：非特异性条带分析;实验技巧：如何提高转染效率;实验技巧：优化WesternBlot结果;???验技巧：提高免疫荧光染色效果;课程总结：回顾重要知识点