转基因抗病植物安全性.pptVIP

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结论外源插入DNA的整体大小转Xa21基因水稻“抗优97”的外源插入DNA大小推测为数百kb。已经测定的外源插入DNA序列长度为73kb;这些转基因序列位于一个分离单元内。转基因位点的结构特征A、重组片段小于200bp的占约2/3。B、64个重组片段中,53个来源于转化载体,6个来源于水稻基因组,5个为FillerDNA。C、重组片段之间具有微同源性。72个片段连接位点中有64个具有微同源性。重组断裂位点在转化载体pC822上是随机分布的。(3)特异性检测方法的建立基因构造转化事件转化质粒构建L2重组位点转基因抗白叶枯水稻抗优97的对环境微生物的影响01转基因作物的生存竞争力,如入侵性、竞争性、杂草性等转基因作物的基因漂流转基因作物对靶标和非靶标生物的影响转基因作物对生物多样性的影响其它环境安全性问题02转基因性状转基因作物研究方法研究微生物参考文献抗除草剂草甘膦油菜培养、DGGE根际细菌群落(S.D.Siciliano1999)抗除草剂油菜FAME、Biolog根际细菌群落(KariE.Dunfield2001)Basta抗性油菜DGGE根际Pseudomonas、Eubacterial群落(StephenGyamfi2002)抗除草剂草甘膦油菜Biolog、FAME、T-RFLP土壤微生物群落(KariE.Dunfield2003)α淀粉酶和转木质素过氧化物酶基因苜蓿Biolog、DNA指纹图谱、微生物呼吸作用土壤细菌、真菌、线虫、原生动物、微小节肢动物(DoneganK.K.1999)木质素过氧化酶基因苜蓿Biolog、ERIC-PCR根际细菌群落(G.D.DiGiovanni1999)GUS基因和Barnase/Barstar雄性不育基因马铃薯T-RFLP土壤细菌群落(ThomasLukow2000)凝集素伴刀豆蛋白A(ConA)和雪花莲凝集素(GNA)马铃薯Biolog土壤细菌群落(GriffithsB.S.2000)T4溶菌酶马铃薯培养产生吲哚乙酸的有益细菌、抗生细菌(JanaLottmann1999)T4溶菌酶马铃薯培养、DGGE接种的抗生细菌、根际细菌群落(JanaLottmann2000)T4溶菌酶马铃薯染色和荧光显微镜根表面的B.subtilis(IngridAhrenholtz2000)T4溶菌酶马铃薯培养、FAMEBiolog、DGGE土壤和根际微生物(HolgerHeuer2002)T4-溶菌酶马铃薯FAME、Biolog、DGGE叶围细菌群落(HolgerHeuer1999)国外关于转基因作物对环境微生物影响研究的现状主要研究角度和研究方法研究角度研究方法定性研究(群落结构)培养Biolog、FAME、微生物呼吸作用非培养(分子)DGGE/TGGE、T-RFLP、ERIC-PCR定量研究(类群数量)选择性培养基(抗生素标记细菌)染色和荧光显微镜(荧光标记细菌)环境微生物的特点:不可培养、分类计数困难BAC抗除草剂油菜对根际土壤微生物的影响转T4溶菌酶基因马铃薯对叶围微生物的影响转T4溶菌酶基因马铃薯对土壤和根际微生物的影响转基因作物对环境微生物影响Hamilton于1980年首先提出了基因工程保护的思想,即在转基因植物中表达病毒基因组序列可能是一种防御侵染的途径。在交叉保护作用的基础上,Sequeira于1984年提出,将CP基因转入到植物体内表达可能会产生保护作用。随后,Beachy于1985年提出利用病毒反意序列获得保护作用的可能性。Sanford和Johnston同年提出具交叉保护作用的病毒的复制酶可能结合到后感染的强病毒RNA中的复制酶结合位点上但无复制活性,从而阻止了强毒株系复制酶的结合。(一)转基因抗病毒的策略病毒CP基因介导的抗性Powell-Abel等(1986)首次报道将TMV的CP基因转入烟草,所获转基因烟草对TMV有很高的抗性。田颖川等(1990)成功地获得了转烟草花叶病毒外壳蛋白基因的烟草转基因植株。利用导入病毒外壳蛋白基因提高烟草抗病性很快应用到其它病毒,如PVY、PVX、CMV、AMV和TRV等,转这些病毒CP基因的烟草对同源病毒都表现出一定程度的抗性。转CP基因抗病毒基因工程成功的实例:01夏威夷转基因番木瓜及其安全性022移动蛋白基因介导的抗性5RNAi介导的抗性3卫星RNA介导的抗性6植物的抗性基因介导的抗性

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