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第2节动物细胞工程
一动物细胞培养
【预习案】
动物细胞工程常用的技术包括、和
等。其中是动物细胞工程的基础。
一、动物细胞培养的概念
动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞的技术。
二、动物细胞培养的条件
1.的环境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(培养液和培养用具灭菌处理,,无菌环境下进行操作,更换培养液,清除代谢物))
2.eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(营养物质:糖类、氨基酸、无机盐、维生素等,血清、血浆:补充培养液中尚未研究清楚的成分))
3.eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(温度:哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜,pH:7.2~7.4))
4.:置于的混合气体的CO2培养箱中eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(O2:细胞代谢所必需的,CO2:维持培养液的pH))
三、动物细胞培养的过程
取动物组织→用方法或用
等处理分散成单个细胞→用
制成→转入培养瓶中进行代培养→贴满瓶壁的细胞重新用
等处理分散成单个细胞制成
分瓶进行代培养(→10代以内保持细胞正常的二倍体核型→10~50代细胞核型可能发生变化→50代以后获得不死性)。
1.悬浮培养:细胞悬浮在培养液中生长增殖。悬浮培养的细胞会因、积累和培养液中等因素而分裂受阻。
2.细胞贴壁:多数细胞贴附在上。
3.接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面时,细胞通常会
的现象称为细胞的接触抑制。
4.原代培养:动物组织经处理后的称为原代培养。
5.传代培养:称为传代培养。传代培养时,悬浮生长的细胞直接用法收集;贴壁生长的细胞要重新用等处理,使之分散成单个细胞,然后用法收集。之后,将收集的细胞制成,分瓶培养。
四、干细胞的培养及其应用
1.干细胞功能:在一定条件下,可以分化成。
2.干细胞的存在:、和等多种组织和器官中。
3.干细胞的种类
【探究案】
合作探究一:动物细胞培养的过程
1.幼年动物的细胞与老年动物的细胞比较,分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较,哪些细胞更易于培养?为什么?
2.动物细胞培养过程中有接触抑制现象,这一现象说明了细胞膜具有什么功能?细胞膜接受信息后,细胞停止分裂又说明了什么?
3.酶处理的相关知识点
①用酶“两次”处理的目的:第一次使用的目的是;第二次使用的目的是。
②使细胞分散开的原因:一是;二是。
③不能用胃蛋白酶处理的原因:由于大多数动物细胞培养的适宜pH为,而胃蛋白酶发挥作用的最适pH为左右,因此不能用胃蛋白酶使细胞分散开。
4.区分原代培养和传代培养的关键是看胰蛋白酶处理的对象。
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