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高等真核生物(不包括酵母)的mRNA的共同特征:poly(A)添加位点上游11-30个核苷酸区域内存在高度保守的AAAAAA序列。绝大部分真核生物mRNA3`端含poly(A)尾巴真核细胞mRNA的结构特点5′“帽子”PolyA3′顺反子m7G5′ppp5′Np-帽子结构功能使mRNA免遭核酸酶的破坏使mRNA能与核糖体小亚基结合并开始合成蛋白质被蛋白质合成的起始因子所识别,从而促进蛋白质的合成。Poly(A)尾巴的功能是mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式它大大提高了mRNA在细胞质中的稳定性与翻译起始有关AAAAAAA-OH(4)真核生物mRNA中常含有内含子EukaryoticmRNAismodified,processed,andtransported原核生物mRNA与真核生物mRNA结构比较核糖体可以不从mRNA上解离连续合成三个蛋白质EukaryoticmRNAProkaryoticmRNA01细菌mRNA:转录和翻译发生在单一细胞区域化部位;其转录、翻译、降解间隔时间很短或同时进行。02真核生物mRNA:合成与成熟完全在细胞核内发生,而翻译在细胞质中完成;其转录、翻译、降解三者间间隔时间较长。转录翻译发生的区域化部位EukaryoticmRNAismodifiedandexported原核生物mRNA寿命较短,通常只能翻译几分钟;真核生物mRNA寿命较长,可持续翻译几小时。生命周期真核生物和原核生物转录机制的差别DNA核核糖体新生蛋白质真核生物原核生物mRNA前体转运加工mRNAmRNARNA聚合酶不相同启动子不同转录后RNA加工修饰不同真核生物中转录与翻译在不同的区域1.顺式作用元件(cis-actingelement)1)RNA聚合酶Ⅱ的启动子(promoter)指不编码任何产物的DNA片段,可影响同一条DNA链上的基因表达。25bp含TATA序列(TATA框,Hogness框)作用:选择转录起点、控制转录精确性。75bp含GGCCAATCT序列(CAAT框)作用:控制转录起始频率。在-80~-110bp区含有GCCACACCC或GGGCGGG序列(GC框)作用:调控起始和转录效率。STEP1STEP2STEP3增强子(enhancer):能显著提高真核生物基因转录效率的一类顺式调控元件。其核心序列常为8-12bp;是一种远端控制元件,又称上游激活序列(upstreamactivatorsequence,UAS)发挥功能时除需RNA聚合酶外,还需转录调控因子与启动子区各种调控元件相互作用3124一个基因可同时拥有一个及以上启动子启动子位置不定,一般在转录起始点上游。可与增强子共同控制转录起始和强度。启动子的作用特点:启动子与增强子的作用特点增强子的作用特点:增强效应十分显著;增强子是通过启动子来增强转录的。增强子的效应很明显,一般能使基因转录频率增加10~200倍,有的甚至可以高达上千倍。例如,人珠蛋白基因的表达水平在巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)增强子作用下可提高600~1000倍。大多为重复序列;增强效应与其位置和取向无关;有效的增强子可以位于基因的5’端,也可位于基因的3’端,有的还可位于基因的内含子中。增强子的作用同增强子的取向(5’一3’或3’一5’)无关,甚至远离靶基因达几kb也仍有增强作用。一般具有组织或细胞特异性;无基因专一性;增强子对同源基因或异源基因同样有效;许多增强子还受外部信号的调控。启动子与增强子的结构比较Transcriptioniscontrolledbyapromoterandenhancer沉默子的DNA序列被调控蛋白结合后阻断了转录起始复合物的形成或活化,使基因表达活性关闭。可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。3)沉默子(silencer)真核生物有3类RNA聚合酶和3类启动子,分别各有一套转录因子。C反式作用因子中,直接或间接结合RNA聚合酶的,则称为转录因子(transcriptionfactor,TF)。BRNA聚合酶Ⅱ的转录因子通常在20个以上,通式为TFⅡX,“X”表示因子类别。D指由调节基因编码的蛋白质,可以控制其他基因的表达。A真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合,而需依靠众多的转录因子。E2.反式作用因子参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ表RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子转录因子分子量(kD
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