DB36T 882-2015 水稻二化螟抗药性检测技术规范-饲料混毒法　　.docxVIP

ICS67.060B22

备案号：48486-2016DB36江西省地方标准

DB36/T882—2015

水稻二化螟抗药性检测技术规范-饲料混毒法

Technologicalrulesformonitoringinsecticideresistanceinstripedstemborer，ChilosuppressalisWalker，usingartificialdietincorporationbioassaymethod

2015-12-21发布2016-03-15实施

江西省质量技术监督局发布

I

DB36/T882—2015

目次

前言 II

1范围 1

2术语和定义 1

3试剂与材料 1

4主要仪器设备 1

5试验步骤 1

6数据统计与分析 3

7抗性水平评估 3

8检测报告编写 4

附录A（资料性附录）部分杀虫剂对水稻二化螟的敏感毒力基线 5

附录B（资料性附录）二化螟人工饲料的组份及其配比 6

II

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前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由江西省农业厅提出并归口。

本标准起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所，江西省修水县植保植检站，江西省余江县植保植检站。

本标准主要起草人：黄水金，陈琼，秦文婧，张华满，徐样庚。

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水稻二化螟抗药性检测技术规范-饲料混毒法

1范围

本标准规定了饲料混毒法检测二化螟（Chilosuppressalis(Walker)）抗药性的方法。本标准适用于杀虫剂对二化螟室内毒力测定和抗药性评估。

2术语和定义

2.1

抗药性Resistence

昆虫忍耐杀死正常种群大部分个体的药量的能力，并在其种群中发展起来的能力。2.2

敏感基线Susceptibilitybaseline

在某种农药使用之前，该种药剂对昆虫敏感品系的毒力回归方程及LD50或LC50。2.3

饲料混毒法Artificialdietincorporationbioassaymethod昆虫幼虫接触、取食混药的人工饲料而中毒死亡的毒力测定方法。

3试剂与材料

3.1供试虫源

4龄初期二化螟幼虫。

3.2试剂与药剂

试剂为分析纯，药剂为农药原药或纯品。

4主要仪器设备

电子天平（感量0.0001g），手持搅拌机，料理机，毛笔，眼科镊，移液器，平底玻璃管（直径3cm，高5cm），1000ml烧杯（直径13cm，高15cm），恒温培养箱、恒温养虫室或人工气候箱，高温高压湿热灭菌锅，微波炉。

5试验步骤

5.1卵块采集、管理及混毒饲料配制

2

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5.1.1卵块采集

卵块从水稻田直接采集，或从田间采集二化螟成虫于室内产卵。

5.1.2卵块孵化及幼虫管理

在玻璃培养皿（直径9cm）中放入滤纸3～4片，并加入适量灭菌蒸馏水保湿，将卵块放入其中，保湿培养至卵块黑头时，将黑头卵块放入装有饲料的玻璃管中，每个玻璃管中放入1～2个卵块，塞上棉花塞。待幼虫从卵块中孵出并爬至饲料上后，将卵块残余部分从玻璃管中挑出来，然后将幼虫放置于温度28℃±1℃,相对湿度60%～70%，光照比（L：D）16：8hrs（下光照）的光照培养箱中培养至4龄初期。

5.1.3药剂配制

用电子天平或移液器称量若干原药，加入水或有机溶剂（如丙酮、二甲基甲酰胺等）溶解配制成药剂母液，然后按所需浓度的量用移液器加入到已装有30ml含10％（m/v）Triton-X100（或吐温80）灭菌蒸馏水的烧杯（直径13cm，高15cm）中，充分混匀后备用。

5.1.4人工饲料配制方法

人工饲料配方进行配制（见附录B）。具体配制方法如下：

a)将各组分按配比称重，备用；

b)将新鲜的茭白切碎，加入水，放入料理机中磨碎并匀浆，匀浆后将其倒入盛有大豆粉、酵母粉、干酪素和蔗糖的灭菌桶中，将上述5种组分充分搅拌均匀后，置于高压蒸汽灭菌锅中，于125℃下灭菌30min，灭菌完毕后，取出备用；

c)琼脂中加入纯净水，用微波炉加热并煮至完全溶解后，将其倒入步骤（b）中已灭菌好的饲料中，用手持搅拌机搅拌混匀，并冷