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四川省卫生厅科学研究项目申报书--第1页
省卫生厅科学研究项目
申报书
项目或课题名称：骨髓间充质干细胞立体成软骨诱导培养及
工程化软骨构建的实验研究
申报单位医学院附属医院
协作单位医学院心肌生理实验室
项目或课题负责人
研究起止年限2005.8～2008.8
通讯地址市太平街25号
联系电话—2869888
申请日期2005.3.16
卫生厅项目编号
四川省卫生厅
二OO五年制
...
四川省卫生厅科学研究项目申报书--第1页
四川省卫生厅科学研究项目申报书--第2页
一、研究目的和主要研究容
研究目的：研究兔骨髓间充质干细胞立体成软骨诱导分化情况，构建特定形态的组织工程
化软骨。
主要研究容：
1.提取、分离、纯化兔骨髓间充质干细胞，并对其进行原代、传代的细胞扩
增培养。将获得的原代和传代培养的兔骨髓间充质干细胞，在成软骨诱导剂下采
用支架进行三维成软骨诱导培养，对诱导培养细胞－支架复合体块进行大体观
察、HE染色、阿新兰染色、甲苯胺兰染色检测软骨细胞基质的合成，并进行免
疫组化及以RT-PCR检测诱导后的细胞II型胶原的表达。
2.上述细胞－支架复合体在经成软骨诱导因子体外诱导培养3周后，将该细
胞－支架复合体植入裸鼠体继续培养，以构建工程化软骨。分别在植入后第6、
10周将植入物取出，采用大体观察、HE染色、阿新兰染色、甲苯胺兰染色，免
疫组化以及原位杂交等鉴定构建的组织的软骨分化情况。
...
四川省卫生厅科学研究项目申报书--第2页
四川省卫生厅科学研究项目申报书--第3页
二、研究背景和依据（国外研究现状、发展趋势、必要性、新颖性、创新
点、研究意义）
研究必要性：软骨与骨不同，在体的再生能力很差，一旦因各种原因损伤，软骨难以
自身修复，最终软骨缺损、造成功能病废。自Hunter首先认识到这一现象以来，针对软骨
[1]
修复的研究已有250年的历史。对于严重的软骨损伤与缺损，虽然软骨移植或骨软骨移植
[2]
有较好的软骨修复效果，但因供体来源有限，妨碍了这种方法的广泛应用。而软骨细胞移
[3]
植存在细胞悬液容易在移植区流失的问题，另外，虽然骨膜移植或软骨膜移植以及支架材
填等方法都能在软骨损伤、缺损处形成修复组织，并缓解临床症状，但通常修复组织
[4]
质量较差，常为纤维软骨，常常不能达到长期恢复功能的效果，因此寻找组织工程化软骨
十分必要。
国外研究现状和发展趋势：近年来，基于组织工程和基因工程技术发展起来的细胞或
组织
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