TCCAA-水体星状病毒检测方法 实时荧光RT-PCR法.pdf

ICS03.120.20

CCSA00

团体标准

T/CCAAXX—XXXX

水体中星状病毒检测方法

实时荧光RT-PCR法

Amethodfordeterminationofastrovirusinwater

real-timeRT-PCR

（征求意见稿）

202X-XX-XX发布202X-XX-XX实施

中国认证认可协会发布

目次

目次II

前言II

1范围3

2规范性引用文件3

3术语和定义3

4设备和材料要求4

5试剂4

6操作步骤4

6.1病毒提取4

6.1.1膜过滤法5

6.1.2水体自动采样及微生物富集系统法5

6.2病毒RNA提取和纯化5

6.2.1病毒裂解6

6.2.2病毒RNA提取6

6.2.3病毒RNA纯化6

6.3质量控制6

6.3.1空白对照6

6.3.2阴性对照6

6.3.3阳性对照6

6.3.4过程控制病毒6

6.3.5外加扩增控制7

6.4实时荧光RT-PCR7

7结果与报告7

7.1检验有效性判定7

7.2结果判定7

7.3结果报告7

8生物安全措施7

附录A9

附录B10

附录C11

附录D13

附录E1

附录F3

T/CCAAXX-202X

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国认证认可协会提出并归口。

本文件起草单位：上海市徐汇区疾病预防控制中心、中华人民共和国丹东海关、拱北海关技术中心、

广州海关技术中心、庄河市检验检测认证技术服务中心、北京美正生物科技有限公司、上海安合环境检

测技术有限公司、国检测试控股集团辽宁有限公司。

本文件主要起草人：刘志勇、麻丽丹、姚丽锋、周傲白雪、丁宁、朱金艳、刘磊、陶文靖、陆嘉诚、

盛琳、杨军、杨希国、李丽、刘石鑫。

Ⅲ

T/CCAAXX-202X

水体中星状病毒检测方法实时荧光RT-PCR法

1范围

本文件给出了水体中星状病毒检测方法实时荧光RT-PCR法检测要求。

本文件适用于水体中星状病毒检测，包括水源水、包装饮用水、食品加工用水、水产养殖用水、海

水、娱乐用水、医疗机构污水和地下水的定性检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测

3术语和定义

GB/T27000界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1星状病毒HepatitisAvirus（HAV）

人星状病毒为无包膜单股正链RNA病毒，病毒颗粒呈二十面体对称，直径28nm～30nm，在电镜

下可见约10%的病毒粒子表面呈特征性五角或六角星状结构。星状病毒基因组合长618kb，有三个开

放阅读框架（ORFs）ORF1a、ORF1b、和ORF2。ORF1a和ORF1b为高度保守区，为编码蛋