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干化学分析技术BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE1
指将液态样品如血浆、血清、尿液等置于含有试剂的固相载体上发生反应,依照反应结果定量测定样品中特定成分的浓度或活度的一项技术。干化学分析是一种专门使用固相载体试剂进行临床化学检验的分析仪,它通过反射光度法、差示电位法等方法定量测出样品中特定成分的浓度或活度。干化学分析仪
干化学技术普遍采用多层膜固相试剂技术,即干式化学的多层膜试剂载体,它集中现代化学、光学、酶工程学、化学计量学和计算机技术于一体,已使其作为定量方法。3干式化学的多层膜试剂载体基于反射光度法的多层膜基于差示电位法的离子选择电极的多层膜基于荧光技术和竞争免疫技术的荧光反射光度法多层膜一、干化学分析技术的基本原理
理论基础:遵从Kubelka-Munk理论光反射率与固相层的厚度、单位厚度的光吸收系数以及固相反应层的散射系数有关系,当固相层厚度和固相反应层的散射系数固定时,光吸收系数同待测物的浓度成正比。4(一)反射光度法
5多层膜干片结构(1)样本扩散层(2)反射层(3)辅助试剂层(4)试剂层(5)透明支持层基于反射光度法的多层膜干片结构示意图
反应过程演示
比色展开层试剂层显色层支持层接收器
以血氨测定为例,氨干试剂片的有效成分是溴酚蓝,其它成分包括表面活性剂、缓冲成分和保湿剂。氨通过半透膜进入试剂层,与指示染料溴酚蓝反应产生颜色产物,其颜色强度也即吸光度与样品中氨含量成正比,由反射光度计在605nm进行吸光度检测,与经同样检测的氨校准品进行比较,得到样品中氨的浓度。血氨测定的分析参数很简单:样品10μl,反应时间5min,波长605nm。
基于传统湿化学分析的离子选择电极原理,用于测定无机离子。(二)差示电位法多层膜结构(1)离子选择性敏感膜(2)参比层(3)氯化银层(4)银层(5)支持层
干化学自动分析仪已广泛应用于检验医学的各个方面,检测的项目已多达70余项,包括常规生化、内分泌激素、毒素、药物浓度分析以及特种蛋白等免疫学检验。10干化学分析仪的分类反射光度法系统胶片涂层技术分析系统袋式分析仪二、干化学分析技术在临床检验中的应用
11干化学分析法的特点:速度快,灵敏度和准确度与典型的分离式仪器相近;应用Lambert-Beer定律时必须符合3个条件:超微量,操作简单,占用空间小,使用过程中灵活机动性强。脱离了传统的分析方法,所有的测定参数均存储于仪器的信息磁场块中;
12区别点干化学湿化学试剂固相,大多无需定标,稳定周期长(数月),全血可直接上机检测液体,需要定标,稳定周期短,全血不可直接上机检测仪器磁卡校正,无需排水系统,分析前后无需清洗每次测试原则上需要校正,需要排水系统,测试前后需清洁反应载体固相介质反应杯检测方法反射光度法透射光度法电解质测定差示电位法离子选择性电极法理论基础Kubelka-Munk理论和Williams-Clapper公式Lambert-Beer定律干化学和湿化学生化检测的主要区别
1.仪器监测2.校准频度3.质控物4.干片试剂的储存与使用5.工作环境温度和湿度13三、干化学分析技术的影响因素
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