香榧子油对实验性动脉粥样硬化形成的影响.pptVIP

香榧子油对实验性动脉粥样硬化形成的影响设计者和执行者：陈超陈小羽江泽红刁燕杜圣富孙永珍香榧子油简介榧子为红豆杉科Taxaceae植物榧树To肼eyagrand括Fort．eXLindl．的干燥成熟种子，始载于《神农本草经》，历版中国药典均收载，具有杀虫、消积、润肠、通便之功效。其栽培品种香榧To用eyagrandisCV．merriUii是我国特有经济树种之一。其种子俗称香榧子，为我国珍贵的干果，炒熟后香酥甘醇，风味独特，品质甚佳，营养丰富香榧子油的药理作用香榧子油。。。。。。降血脂和降低血清胆固醇作用调节老化的内分泌系统的疗效软化血管，促进血液循环但未见有关香榧子油对预防动脉粥样硬化形成的实验研究报道脂质的作用：高胆固醇血症引起内皮功能障碍，通透性增加巨噬细胞和平滑肌细胞的作用内皮损伤：各种因素对动脉内皮的损伤，导致动脉壁的慢性炎症应答，逐渐形成粥样斑块，是动脉粥样硬化的始动因素动脉粥样硬化的发病机制主要内容：实验目的实验设计预测结果实验假设实验目的：从血脂,斑块面积／内膜面积、内膜厚度、内膜厚度／中膜厚度,巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞等方面研究香榧子油对实验性动脉粥样硬化形成的影响.研究方面：研究香榧子油对实验性动脉粥样硬化形成的影响231脂质斑块面积／内膜面积、内膜厚度、内膜厚度／中膜厚度巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞实验假设：香榧子油对实验性动脉粥样硬化形成可能有预防作用2015实验仪器2019M12016实验试剂2020M22017实验方法及步骤2021M42018实验对象2022M3实验设计:电子称，试管，离心管，冰箱，手术器材，一次性塑料注射器，图像分析仪岛津UV．3000型紫外分光光度计，刖一182放射免疫卜计数仪。01021）实验仪器:2）实验试剂：基础饲料（小麦粉39．2％、玉米粉15．1％、大米10．5％、豆粕15．1％、鱼粉15．1％、酵母粉，3．8％、鱼肝油0．7％及精盐0．5％）,高脂饲料(基础饲料82．5％、胆固醇2．0％、胆酸钠0．5％、蛋黄粉5．0％及猪油10％),香榧子油饲料(在高脂饲料的基础上添加香榧子油(自提)，其量占饲料的2％)。生理盐水、蒸馏水、乙醚。苏丹Ⅲ染液，苏木素依红(HE)、间苯二酚品红染色(ET+VG),2％戊二醛溶液,P0wervision一Pv6002试剂盒3）实验对象：30只健康家兔4）实验方法和步骤：1.计算斑块面积／内膜面积比2.计算内膜厚度／中膜厚度比3.计算巨噬细胞和平滑肌源性泡沫细胞阳性百分数采用SPSS8．0统计软件进行数据的分析处理实验分组与模型建立实验步骤统计分析1.动物按体重随机分3组2.建立高胆同醇饮食并免疫损伤诱导动脉粥样硬化模型动物按体重随机分3组，即正常对照组(基础饲料组)、高脂对照组和香榧子油实验组，每组10只动物。1模型组和香榧子油组建立高胆同醇饮食并免疫损伤诱导动脉粥样硬化模型（2％高胆固醇饲料每只每日100克喂养，两周后静脉注射牛血清白蛋白2．50mg／kg(以生理盐水制成10％溶液注射)每周1次，共3次；正常组注射等量生理盐水，每周1次，共3次。同时香榧子油组予灌胃法给药香榧子油[4rag／(kg·d)]，相当于75mg／d的l临床剂量，共12周，正常组和模型组灌等量蒸馏水。每周测量体重。）2实验分组与模型建立在实验分组与模型建立基础上第4、8、12周时取尾血，取血前12小时禁食。第12周末取尾血后，乙醚麻醉，剖开胸腔心脏取血。所取尾血置于洁净试管中后，2500r／min离心5min，取血清分装于3～4支1．5ml塑料尖底离心管中于0.30度冰箱保存，用酶学法测血清TC（胆固醇）、TG（甘油三酯）及HLD-C（高密度脂蛋白胆固醇）。处死动物，取主动脉剥离外膜脂肪组织，纵行剖开置于4％多聚甲醛中保存。大体标奉行苏丹Ⅲ染色后摄像．图像分析仪测定斑块面积和内膜面积，计算斑块面积／内膜面积比。实验步骤：于胸主动脉上段(第4肋问动脉处)和腹主动脉上段(腹腔动脉处)各取材5mm，常规石蜡包埋，连续切片，制成4μm厚横截面切片，分别行苏木素依红(HE)、间苯二酚品红染色(ET+VG)染色。将动脉等距分成5点(包括内膜最厚处)，利用图像分析仪测量内膜厚度、中膜厚度，计算内膜厚度／中膜厚度，最后将两段组织的指标加以平均。每组取2例动物胸主动脉上段组织放人2％戊二醛溶液中固定，扫描和透射电镜观察超微结构改变。另取4μm厚胸主动脉上段组织(第4肋间动脉处)横截面切片用小鼠抗兔一巨噬细胞单克隆抗体RAM11和小鼠平滑肌细胞单克隆抗