血清蛋白质含量的测定.pptVIP

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2025-03-24 发布于四川
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血清蛋白质含量的测定.ppt

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No.3血清总蛋白含量的测定实验目的030201熟悉血清总蛋白的测定方法（双缩脲法）掌握血清总蛋白测定的临床意义2球蛋白35~50g/L3血清蛋白白蛋白20~40g/L血清总蛋白蛋白质含量测定的几种方法45凯氏定氮法（图）6凯氏定氮法01样品中的有机氮02浓硫酸03催化剂04无机铵盐05+OH-06NH307用酸吸收08根据酸的增重算出样品中氮的含量097紫外吸光光分度计8Folin－酚试剂9考马斯亮蓝10实验原理双缩脲+双缩脲试剂紫红色络合物双缩脲试剂11相似的肽键+双缩脲试剂紫红色络合物血清总蛋白的吸光度在一定浓度范围内和样品中蛋白质的浓度成正比，同蛋白质标准液比较后，即可求得蛋白质的量。12NHCOCH3如：双缩脲反应并非是蛋白质特有的颜色反应！凡分子内含有2个或2个以上甲酰基氨基（-CONH2-）均可呈双缩脲反应。3HCCONH13注意！实验试剂1.生理盐水：NaCl0.9g溶于100ml蒸馏水2.双缩脲试剂：硫酸铜3.0g溶于500ml蒸馏水，加酒石酸钾钠9.0g,碘化钾5.0g，完全溶解后，加入24%NaOH100ml，用蒸馏水稀释到1L，置聚氯乙烯瓶内盖紧保存。3.蛋白质标准液：收集混合血清，经凯氏定氮法定值，用作蛋白质标准液。贮于冰箱中备用。也可用100mg/ml牛血清白蛋白替代。4.待测血清用生理盐水1:10稀释。14溶血15收集的血清要求无黄疸，无溶血，乙型肝炎表面抗原阴性，肾功能正常。乙型肝炎黄疸注意黄疸：肝功能不正常；（肝脏是合成蛋白质的重要场所）溶血：如红细胞中的血红蛋白被释放到血液中，使测量值偏大血清蛋白质是各种蛋白的复杂混合物，含有白蛋白、a1、a2、β球蛋白，纤维蛋白原，凝血酶原等16WHY?