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大鼠原代细胞血脑屏障模型构建及穿膜肽功能评估研究

目录

大鼠原代细胞血脑屏障模型构建及穿膜肽功能评估研究（1）．．．．．．3

研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1血脑屏障概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2原代细胞培养技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.3穿膜肽在药物递送中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

2.1实验动物与细胞来源．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.2原代细胞血脑屏障模型的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.3穿膜肽的合成与表征．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.3.1穿膜肽的设计与合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.3.2穿膜肽的纯化与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.4功能评估实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.4.1穿膜肽的细胞内摄取实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.4.2穿膜肽的生物活性检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

3.1原代细胞血脑屏障模型的建立与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

3.1.1细胞形态学观察．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

3.1.2血脑屏障功能检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

3.2穿膜肽的细胞内摄取与分布．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

3.2.1穿膜肽的摄取效率．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

3.2.2穿膜肽在细胞内的分布．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

3.3穿膜肽的生物活性评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

3.3.1穿膜肽的细胞毒性测试．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.3.2穿膜肽的靶向性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

大鼠原代细胞血脑屏障模型构建及穿膜肽功能评估研究（2）．．．．．28

一、内容概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

1.2研究目的与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

1.3研究方法与技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

2.1实验动物与分组．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.2原代细胞培养与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.3血脑屏障模型的建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

2.4穿膜肽的筛选与制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

2.5功能评估指标与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

三、大鼠原代细胞血脑屏障模型的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

3.1细胞接种与培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

3.2血脑屏障模型的建立与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

3.3模型验证与表征．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．