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荧光原位杂交技术在产前诊断中应用的专家共识

目前，G显带的染色体核型分析技术仍然是细胞遗传学产前诊断的金标准，但该技术具有细胞培养耗时长以及耗费人力的局限性。随着分子细胞遗传学的发展，新的实验方法不断出现，并逐步走向临床，目前，在临床工作中已开展的有荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization，FISH)、荧光定量PCR(QF-PCR)、多重连接探针扩增技术(multiplexligationdependentprobeamplification,MLPA)、产前液相芯片技术(BACs-on-Beads,BoBs)等技术。这些分子遗传学诊断技术无需细胞培养，分析周期短，可以快速检出胎儿常见的染色体非整倍体异常，显示出高通量、快速、易于大规模开展的优势，对于解决当前以细胞遗传学核型分析为主流技术的产前诊断技术服务能力不足、诊断周期长等问题具有重要的现实意义。FISH技术是利用荧光标记的特异性寡核苷酸片段作为探针，与染色体、细胞或组织中的核酸按照碱基互补配对原则进行杂交，通过荧光系统检测，对待测DNA进行定性或相对定位分析。相对于传统的核型分析技术，FISH技术具有快速及特异性高的优点。更由于其直观性，成为众多遗传学诊断技术的有效验证方法，具有广阔的应用前景。

FISH技术的临床应用已有20多年的历史。1993年，美国医学遗传学学会(AmericanCollegeofMedicalGenetics，ACMG)发布了FISH技术应用于产前诊断的技术说明?[?1?]，指出在充分知情同意的前提下，FISH技术与传统的核型分析技术结合可用于胎儿常见染色体(13、18、21、X、Y)非整倍体异常的产前检测；还可用于出生缺陷及智力低下的检测(包括染色体微缺失及微重复综合征、标记染色体或衍生染色体)等方面。2000年，ACMG基于多中心的研究数据发布了FISH技术临床应用的技术标准?[?2?]，认为FISH技术是1种准确性很高的检测技术，可标准化并易于质量控制管理；FISH产前检测结果异常可出具报告，但临床决策时应该考虑染色体核型分析进一步验证以及后续临床信息的支持。2010年，ACMG修订了临床细胞遗传学技术标准及指南?[?3?]，对FISH技术制定了详细的技术路线、分析标准及质量控制要求。近年来，其他一些国家和地区也发布了相关的技术规范或指南?[?4?,?5?,?6?,?7?]。

我国临床开展FISH技术也有多年的历史?[?8?]。其应用大致有以下几类情况：(1)对胎儿常见染色体非整倍体的快速产前诊断；(2)对产前(或出生后)核型分析结果异常或其他分子细胞遗传学检测(如染色体微阵列分析)结果异常，但无法确认异常染色体片段的来源或性质者，进行目标染色体的验证；(3)对自然流产、死胎等妊娠产物的遗传学分析。在产前诊断领域中，主要应用于第1种情况，目前，已有经国家食品药品监督管理局批准注册的用于常见染色体非整倍体检测的商品化探针试剂盒。

FISH技术作为1种快速产前诊断技术，其临床应用已较为广泛，我国的产前诊断专家组在多次讨论中也提出：可将FISH技术用于唐氏综合征血清学产前筛查高风险、产前核型分析细胞培养失败及孕周大的孕妇，作为核型分析技术的有效补充?[?9?,?10?]。但在我国至今缺乏FISH技术用于产前诊断的相应技术规范。如何统一各级医务人员的认识，正确定位FISH技术适宜的临床应用指征，确定其在临床使用中的技术路线、产前咨询、规范应用等，均是亟须解决的问题。在这种形势下，由国家卫生和计划生育委员会召集、北京协和医院产前诊断中心主办的全国产前筛查与诊断技术管理规范编制研讨会于2015年11月14日在成都召开，会议就FISH等快速产前诊断技术的临床应用进展及其在国内应用存在的具体问题进行了深入而广泛的探讨，并形成了FISH技术在产前诊断中应用的专家共识。

一、FISH技术的临床应用指征及标本类型

1．FISH技术的临床应用指征：

(1)唐氏综合征血清学产前筛查高风险孕妇，有常见染色体非整倍体产前诊断要求，无不良孕产史，超声检查未发现异常者。

(2)无创性产前基因检测(noninvasiveprenataltesting，NIPT)高风险孕妇，需要明确诊断者。

(3)FISH作为快速产前诊断技术与细胞遗传学技术(染色体核型分析)联合应用，可对所有具备侵入性细胞遗传学产前诊断指征的胎儿进行检测(参照细胞遗传学产前诊断指征)，有助于尽早获得胎儿常见染色体数目的信息。

(4)对于孕周过大、染色体核型分析细胞培养失败或其他原因不能行细胞遗传学产前诊断者，FISH技术可作为补救诊断手段之一，能提供常见染色体非整倍体异常的检测。

(5)FISH技术与其他分子遗传学诊断技术联合应用，在临床应