高三生物二轮复习课件基因工程专题.pptx

基因工程

1、什么是基因工程？2、基因工程一般步骤？3、每一个步骤的操作方法及考点分别是什么？请以20题利用农杆菌转化法将Bapt基因导入紫杉醇细胞为例来说明基因工程的一般步骤和各步骤的注意事项。

[2018全国1卷]艾弗里肺炎双球菌转化实验对基因工程启示：DNA可从一种生物个体转移到另外一种生物[2017全国1卷]DNA为什么能实现不同生物的转移，从结构和功能两个方面进行分析？DNA双螺旋结构(结构上的可能性)；生物界共用一套遗传密码(功能上可能性)科学家将非洲爪蟾中能表达抗菌肽的基因转入大肠杆菌，并在大肠杆菌表达相同的抗菌肽，说明了。生物界共用一套遗传密码①质粒可以作为基因工程的载体；②重组DNA可以进入受体细胞；③不同物种之间可以实现基因交流[2018全国1卷]博耶和科恩将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌表达：重组的DNA转入大肠杆菌中，转录出相同的mRNA,说明了？

①获取目的基因的方法有哪些？

基因组文库从细胞中提取DNA细胞基因组DNA质粒质粒酶切DNA连接酶连接限制酶酶切导入细菌中基因组文库克隆提取酶切的DNA片段cDNA文库逆转录逆转录酶酶切的cDNA片段限制酶酶切质粒质粒酶切连接导入细菌中cDNA文库克隆提取基因组DNA限制酶酶切mRNA逆转录得cDNA，酶切拼接质粒，导入细菌中保存为文库基因组文库cDNA文库（部分基因文库）

一、PCR的原理及应用1、PCR的原理；条件；扩增的过程怎样？P1472021湖北卷16.某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是（）A.增加模板DNA的量 B.延长热变性的时间C.延长延伸的时间 D.提高复性的温度温度低时，即使引物和模版之间的匹配不完全，氢键也可能足够稳定，导致引物结合到非目标区域，而合适的高温条件下，只有完全互补的区域才能稳定结合。

一、PCR的原理及应用1、PCR的原理；条件；扩增的过程怎样？2、关于PCR的考点总结：P147①PCR中引物的选择与设计：如何选择引物？会写引物序列？②PCR过程中的计算；③PCR的应用：在目的基因两端加上特定的限制酶识别序列；利用PCR获得融合基因；定点突变，改造基因。④⑤

某科研团队为建立具有红色荧光的转基因小鼠，将红色荧光基因R（左图）插入表达载体（右图）中，构建基因表达载体。已知图中R基因的转录方向为从左到右，几种限制酶的识别序列和切割位点见下表。回答下列问题。(2)已知R基因转录形成的mRNA序列为5’—UGAACGCUA．.....（中间序列）…..GUCGACUCG—3’，请写出R基因进行PCR扩增时所用的2种引物序列???????????????????????、???????????????????。（各写出6个碱基序列即可）P147(3)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。第??????轮循环产物中开始出现目的基因两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，第4轮循环后，产物中目的基因两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段有????????????个。

20022240226822(n-1)2n-2n137152n-12×2n-22

某科研团队为建立具有红色荧光的转基因小鼠，将红色荧光基因R（左图）插入表达载体（右图）中，构建基因表达载体。已知图中R基因的转录方向为从左到右，几种限制酶的识别序列和切割位点见下表。回答下列问题。(2)已知R基因转录形成的mRNA序列为5’—UGAACGCUA．.....（中间序列）…..GUCGACUCG—3’，请写出R基因进行PCR扩增时所用的2种引物序列???????????????????????、???????????????????。（各写出6个碱基序列即可）P147(3)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。第??????轮循环产物中开始出现目的基因两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，第4轮循环后，产物中目的基因两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段有????????????个。

ABCDEABCDEABCDEACBCDEAD引物丙引物乙引物甲若是选用不同的引物搭配，扩增结果有何不同？

ABCABCDEABCDEAC引物丙引物乙引物丙引物乙BCAABCBCA引物丙引物乙若选用引物乙丙，扩增产物为乙丙之间的片段，大小为350bp。若