药物靶标发现与筛选.pptVIP

基因表达中的信息流中心法则（TheCentralDogma）蛋白质翻译蛋白质结构的层次一级结构-氨基酸序列二级结构-主要由氢键稳固的局部构象，如?-helix,?-sheet等三级结构-三维构象四级结构-多个多肽链的组合二、核糖核酸靶标反义寡核苷酸反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,asON)人工合成的，与靶基因或mRNA某一区段互补的核酸片断，可以通过碱基互补原则结合于靶基因/mRNA上,从而封闭基因的表达。包括：反义DNA，反义RNA，其来源可有人工合成和体内表达两类。反义寡核苷酸可用于基因沉默，所以是一种研究基因功能的重要工具。大多数药物属于靶标基因（或疾病基因）的抑制剂，因此反义寡核苷酸模拟了药物的作用，这功能丢失（LOF)的研究方法比传统的功能获得（GOF)方法更具优势。同时，那些在靶标实验中证明有效的反义寡核苷酸本身还可以被进一步开发成为反义寡核苷酸药物。

Table1.PS-ODNstargetingtheM.tuberculosis30,32A,and32Bprotein(分枝酰基转移酶)genetranscriptsmRNAtarget5?3PS-ODN5???330-kDaprotein30:1–24AATCTTTCGGCTCACGTCTGTCAT30:HP2/HP1GCGCATATGCGCAATCTTTCGGCTCACGTCTGTCATGCGCGCGC30:1–24-MMAtTCaTTtGGtTCtCGaCTcTCtT30:HP2/HP1-MMGCGCATATGCGCAtTCaTTtGGtTCcCGaCTcTCtTGCGCGCGC32A-kDaprotein32A:1–24ACGAACCCTGTCAACAAGCTGCAT32A:HP2/HP1GCGCATATGCGCACGAACCCTGTCAACAAGCTGCATGCGCGCGC32A:1–24-MMAgGAtCCtTGaCAtCAtGCaGCtT32A:HP2/HP1-MMGCGCATATGCGCAtGAtCCaTGcCAgCAtGCaGCtTGCGCGCGC32B-kDaprotein32B:1–24TCGCACCTGTTCGAAGAACGTCAT32B:HP2/HP1GCGCATATGCGCTCGCACCTGTTCGAAGAACGTCATGCGCGCGC32B:1–24-MMTgGCtCCaGTaCGtAGtACcTCtT32B:HP2/HP1-MMGCGCATATGCGCTgGCtCCaGTaCGtAGtACcTCtTGCGCGCGCInhibitionofM.tuberculosisgrowthbyantisenseHPS-ODNsspecificforthe30/32-kDaproteingeneplex.ProcNatlAcadSciUSA.2007;104(17):7199-7204ProcNatlAcadSciUSA.2007;104(17):7199-7204SpecificinhibitionofproteinsynthesisbyantisenseHPS-ODNs.ProcNatlAcadSciUSA.2007;104(17):7199-7204Inhibitionof30,32A,and32BproteingenetranscriptsynthesisHPS-ODNinhibitionofM.tuberculosismultiplicationinhumanmacrophagesProcNatlAcadSciUSA.2007;104(17):7199-720402二、核糖核酸靶标3、RNA干扰技术转录后基因表达抑制现象的发现＋CHSGene矮牵牛花(Jorgensen,R,1990)CHS:与色素合成相关的酶,以加深花的颜色RNAi现象的发现线虫（C.elegans)(AndrewFire,1998)+Par-1GeneDisruptionExpressionDownDoubleStrandRNA线虫，果蝇微生物，植物失败的原因:在合成反义RNA时存在技术问题,用于注射的正义和反义RNA中都混有少量双链RNARNAi抑制基因表达的机理