2025年生理学实验综合分析与报告指南.doc

生理学试验汇报

试验一坐骨神经-腓肠肌标本制备

[1]试验目的

1.学习机能学试验基本的组织分离技术；

2.学习和掌握制备蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的措施；

3.理解刺激的种类。

[2]试验原理

蛙类的某些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几种小時内可保持不变。若給神经或肌肉一次合适刺激，可在神经和肌肉上产生一种动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在机能学试验中常运用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋、兴奋性，刺激与反应的规律和肌肉收缩的特性等，制备坐骨神经腓肠肌标本是机能学试验的一项基本操作技术。

[3]试验对象

蛙

[4]试验药物

任氏液

[5]仪器与器械

一般剪刀、手术剪、眼科镊（或尖头无齿镊）、金属探针（解剖针）、玻璃分针、蛙板（或玻璃板）、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器。

[6]试验措施与环节

①破坏脑、脊髓

取蛙一只，用自来水冲洗洁净（勿用手搓）。左手握住蛙，使其背部向上，用大拇指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起為宜)。右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管（图3-1-1）。然后将探针改向前刺入颅腔内，左右搅动探针2～3次，捣毁脑组织。假如探针在颅腔内，应有碰及颅底骨的感觉。

再将探针退回至枕骨大孔，使针尖转向尾端，捻动探针使其刺入椎管，捣毁脊髓。此時应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉是，进针時有一定的阻力，并且伴随进针蛙出現下肢僵直或尿失禁現象。若脑和脊髓破坏完全，蛙下颌呼吸运动消失，四肢完全松软，失去一切反射活动。此時可将探针反向捻动，退出椎管。如蛙仍有反射活动，表达脑和脊髓破坏不彻底，应重新破坏。

图2-1-1

②剪除躯干上部、皮肤及内脏?

用左手捏住蛙的脊柱，右手持粗剪刀在前肢腋窝处连同皮肤、腹肌、脊柱一并剪断（图3-1-2），然后左手握住蛙的后肢，紧靠脊柱两侧将腹壁及内脏剪去（注意避开坐骨神经），并剪去肛门周围的皮肤，留下脊柱和后肢（图2-1-3）。

图2-1-2横断脊柱图2

③剥皮?

一只手捏住脊柱的断端（注意不要捏住脊柱两侧的神经），另一只手捏住其皮肤的边缘，向下剥去所有后肢的皮肤（图2-1-4

图2-1-4

④分离两腿?

用镊子取出标本，左手捏住脊柱断端，使标本背面朝上，右手用粗剪刀剪去突出的骶骨（也可不进行此步）。然后将脊柱腹侧向上，左手的两个手指捏住脊柱断端的横突，另一手指将两后肢担起，形成一种平面。此時用粗剪刀沿正中线将脊柱盆骨分為两半（注意勿伤坐骨神经）。将其中二分之一后肢标本置于盛有任氏液中备用，另二分之一放在蛙板上进行下列操作。

⑤辩认蛙后肢的重要肌肉

蛙类的坐骨神经是由第7、8、9对脊神经从相对应的椎间孔穿出汇合而成，行走于脊柱的两侧，到尾端（肛门处）绕过坐骨联合，抵达后肢背侧，行走于梨状肌下的股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟内，抵达膝关节腘窝处有分支进入腓肠肌。

⑥游离坐骨神经和腓肠肌

用蛙钉或左手的两个手指将标本绷直、固定。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经，然后在标本的背侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内将坐骨神经与周围的結缔组织分离直到腘窝，但不要伤及神经，其分支待后来用手术剪剪断。同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的結缔组织分离并在其跟腱处穿线、結扎。

⑦剪去其他不用的组织，操作应从脊柱向小腿方向进行。

(a)剪去多出的脊柱和肌肉??

将后肢标本腹面向上，将坐骨神经连同2～3节脊椎用粗剪刀从脊柱上剪下来。再将标本背面向上，用镊子轻轻提起脊椎，自上而下剪去支配腓肠肌以外的神经分支，直至腘窝（图3-1-5A），并搭放在腓肠肌上。沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，并将股骨刮净，用粗剪刀剪去股骨上端的1/3（保留2/3），制成坐骨神经-小腿的标本。

(b)完毕坐骨神经腓肠肌标本?

将脊椎和坐骨神经从腓肠肌上取下，提起腓肠肌的結扎线剪断跟腱。用粗剪剪去膝关节如下部位，便制成了坐骨神经-腓肠肌标本（图3-1-5B）。

⑧检查标本?

用镊子夹持坐骨神经中枢端，如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，阐明标本的兴奋性良好。标本浸入盛有任氏液的培养皿中备用。

图2-1-5

[7]注意事项

①在操作过程中，应給神经和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性。

②标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟，使标本兴奋性稳定，再开始试验效果会很好。

[8]试验图像

[10]成果及分析

①捣毁脑脊髓后的蛙应有何体現？

进针時有一定的阻力，并且伴随进针蛙出現下肢僵直或尿失禁現象。若脑和脊髓破坏完全，蛙下颌呼吸运动消失，四肢完全松软，失去一切反射活动。

②制备好的神经肌肉标