动物细胞培养课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

胞动物细动物细胞培养第2节（第一课时）第2章细胞工程

自主预习阅读P43-44，快速找答案1）动物细胞工程的3大技术2）动物细胞培养的4大条件3）找几个名词：细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养

动物细胞工程常用三大技术动物细胞培养动物细胞工程的基础动物细胞融合动物细胞核移植克隆皮肤单克隆抗体克隆猴：中中和华华

从社会中来小面积烧伤：患者通过切除+植皮(自身)后恢复。大面积烧伤？皮肤的自体移植使用他人皮肤如何？患者自身的不够用，如何解决？培养自身细胞？目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。通过细胞培养构建的人造皮肤

动物细胞培养的条件PART01

一、动物细胞培养的条件动物细胞培养1.概念2.原理3.目的4.培养对象选择取动物组织，将它分散成单个细胞，在适宜条件生长和增殖的技术。细胞增殖（有丝分裂）幼龄动物or老龄动物？Why?幼龄个体细胞分化程度低、分裂能力强获得细胞或者细胞产物胚胎或幼龄动物的细胞

一、动物细胞培养的条件动物细胞培养5.培养条件营养条件其他条件糖类氨基酸无机盐维生素无菌、无毒的环境适宜温度、pH和渗透压适宜的气体环境动物细胞培养基本条件

一、动物细胞培养的条件动物细胞培养营养直接用合成然培养基吗？Why？合成培养基+血清等天然成分含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。血清等天然成分将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。合成培养基一般使用液体培养基也称培养液。

一、动物细胞培养的条件动物细胞培养无菌、无毒的环境无毒无菌防止微生物污染清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。目的：定期更换培养液①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理②在无菌环境下进行操作③添加一定量的抗生素如何维持无菌、无毒的环境？

一、动物细胞培养的条件动物细胞培养温度、pH、渗透压（36.5±0.5）℃；pH7.2-7.4；适宜的渗透压气体环境95%空气（细胞代谢必需）和5%CO2（维持pH）培养皿或松盖培养瓶置于CO2培养箱。液体培养基气体环境？分别有什么作用？使用什么装置？CO2培养箱松盖培养瓶

动物细胞培养的过程PART02

二、动物细胞培养的过程自主预习阅读P44-45,思考并回答下列问题：1.动物细胞培养过程为什么将组织分散成单个细胞呢？可用什么方法？2.体外培养动物细胞有哪些类型？3.什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？4.什么是原代培养和传代培养？5.为什么要进行分瓶培养？怎么处理？6.动物细胞培养与植物组织培养有什么异同？

二、动物细胞培养的过程1.取动物组织取材对象:取材原因:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。细胞分化程度低，增殖能力强。2.分散成单个细胞原因：①从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖。②利于细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。制成细胞悬液取动物组织

二、动物细胞培养的过程2.分散成单个细胞蛋白质不可以，因为胃蛋白酶的最适PH为1.5左右细胞膜也含蛋白质，长时间会分解细胞膜蛋白，破坏细胞结构，把细胞消化掉。注意控制时间和酶用量。①说明动物细胞间的物质主要是什么成分？②用胃蛋白酶可以吗？③胰蛋白酶处理时间过长，会怎样？机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间3.制备细胞悬液用培养液将细胞制成细胞悬液。方法:

二、动物细胞培养的过程4.原代培养制成细胞悬液取动物组织放入CO2培养箱中培养转入培养瓶或培养皿进行原代培养悬浮生长类：贴壁生长类：培养细胞类型：能够悬浮在培养液中生长增殖。需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。（大多数）这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。——细胞贴壁指动物组织经处理后的初次培养。概念:要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞贴壁过程

二、动物细胞培养的过程4.原代培养当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。悬浮生长类：贴壁生长类：培养细胞类型会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。除受以上因素影响外，还会发生接触抑制现象。思考：细胞培养一段时间，分裂会受阻，这是为什么？怎样解决这一问题？贴壁生长与接触抑制

二、动物细胞培养的过程4.原代培养肿瘤细胞癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少正常细胞瓶壁上的细胞层数是：一层（或单层）失去接触抑制，可以形成多层细胞正常细胞增殖到相互接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，会使细胞停止继续增殖，出现接触抑制的现象。某些异常细胞能解除这种现象。体外动物细胞培养如何解决细胞分裂受阻的问题呢？需要对细胞进行分瓶培养，让细胞继续增殖。

二、动物细胞培养的过程5.传代培养制成细胞悬