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Chapter11Transgenicplantsandanimals;;Possibletargetsforcropplantimprovement;外植体:植物转基因的受体
外植体的选择:
优先叶片、子叶、胚轴等
年龄和最佳感受态期
转化体易于组织培养,易再生
易转化分生组织感受态细胞所在的部位及数量;用于转化的植物细胞需具备:
高效稳定的再生能力
与分化和生理状态有关,一般要高于80%
较高的遗传稳定性
稳定的外植体来源
对选择性抗生素敏感,便于筛选
对农杆菌敏感,能有效接受外源基因;用于转化的植物细胞包括:;11.3.2Methodsforintroducing
clonedDNAintoplantcells;2)???Biologicalmethod;RNAviruse(TMV,Tobaccomosaicvirus,andPVX,PotatovirusX)
Thevirusesofplantsneverintegrateintothegenomeandarenottransmittedthroughseeds,sostabletransformationcannotbeachieved,however,plantvirusesoftencausesystemicinfections;B?ThemostwidelyusedarebasedonTiplasmidsfromAgrobacteriumtumefaciens,resultinginthestabletransformationoftheinfectedcell,andthetransferredDNAbehavesasanewgeneticlocus
C?Riplasmid;植物转基因的其它分类;stop;11.3.3Tiplasmid;T-DNA:theregionofTiplasmidsresponsiblefortumorformation
约25kb
Intheplant,theTiplasmidDNAintegratesintooneoftheplantchromosomesbasedonT-DNA
主要两大功能:
决定肿瘤的形成和形态
控制crowngall的合成
TransferoftheDNAsegmentfromtheTiplasmidtoaplantchromosomerequirestwo25-bpsequencesthatflanktheT-DNA,aswellasseveralgeneslocatedintheTiplasmid;构建Ti质粒克隆载体的途径;2)TwoapproachesusingTi-based
plasmids;B.Thebinaryvectorsystem;Genesclonedintomini-Tiplasmidsareincorporatedintotheplantcellgenomebytranscomplementation
TheT-DNAplasmidissmallenoughtohaveauniquerestrictionsiteandtobemanipulatedusingstandardtechniques;Tripartiteortriparentalcross;;;Methodofleafdiscs;11.3.5Riplasmid;11.3.6Cloninggenesinplantsbydirect
genetransfer;1983年,通过农杆菌获得第一例转基因植物---转基因烟草;11.3.7Puttingthetechnologytowork;Somepharmaceuticalrecombinanthumanproteinsexpressedinplantsystem;日本农水省生物资源研究所等单位将人乳腺中产生乳铁蛋白的基因导入番茄品种“秋玉”中开发出一种基因重组番茄。???番茄能生产母乳中所含的具有提高免疫机能和防止感染的作用、具有增加铁质功效的多功能蛋白质-乳铁蛋白;抗虫基因;11.4Transgenicanimals;11.4.
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