基因工程技术生产重组蛋白.ppt

从基因到蛋白的复制、转录和翻译过程

;什么是基因工程;什么是重组蛋白;;TheDNAcontainingthegenemustbeisolatedawayfromitsgenomiccontext

Thatshouldbesimple–buttherearebigproblems

;;重组蛋白表达的典型穿梭载体。

MCS=多克隆位点；

Op=细菌复制起始位点；

Mp=细菌中的选择性基因；

ME=真核生物中的选择性基因；

OE=真核复制起始位点；

PE=真核启动子；

TE=真核中止子；

hG=表达的外源基因。;重组蛋白的表达系统;1、原核生物表达系统细菌(E.coli.);2、真核生物表达系统酵母菌(Yeast);3、动物细胞;4、昆虫细胞;4、新型真核表达系统盘基网柄菌;盘基网柄菌的生命周期;;吞噬细胞(Phagocytosis〕;细胞聚集(Aggregation);;移动阶段(Migrationphase);顶点〔Culmination〕;植物体形成;不同表达系统的比较;重组基因工程菌的高密度培养;碳源种类的选择;;流加培养;;基因工程菌的固定化培养;固定化培养基因工程菌细胞;载体外表和内部的细胞固定化电镜扫描照片;生物微胶囊固定化;;;;固相析出别离法

盐析法

有机溶剂沉淀法

等电点沉淀

其它沉淀法

?水溶性非离子型聚合物沉淀剂

?金属离子和络合物沉淀

?离子型多聚物沉淀剂

?亲和沉淀

结晶法;重组蛋白的色谱别离法

凝胶色谱/分子筛色谱

离子交换

亲和层析

电色谱