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金银花抑菌成分抑菌性研究
目录
TOC\o1-2\h\u13442金银花抑菌成分抑菌性研究 0
30064引言 1
5031.材料与方法 2
266501.1主要材料与仪器 2
259791.1.1材料 2
95201.1.2实验药品 2
104891.1.3培养基 2
219071.1.4实验仪器 2
260661.2实验内容 3
77232.结果与分析 5
116512.1实验结果 5
102762.1.4石榴皮多酚对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)的测定结果分析 7
168202.2结论 7
3678参考文献 8
摘要:金银花因其退热降火等功效被人们熟知,金银花常被用于泡水饮用,其价格低廉作用广泛口味独特深受大众喜爱。许多植物中都含有多酚,金银花中的有效成分多酚物质具有抑菌性,可以作为抑菌消炎的药物作用于人体,本文利用水提法、乙醇提取法来提取出金银花中多酚物质,比较二者多酚的率的高低,实验证明水提法多酚得率为1.05%,乙醇提取出多酚得率为2.17%,发现乙醇提取的多酚得率更高;用牛津杯法检测金银花提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、粘质沙雷氏菌的抑制作用;用红四氮唑法在96孔板中得出金银花多酚物质对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)为30mg/ml。
从金银花中提取的抑菌成分可有效的抑制多种有害菌的活性,可作为天然药物、食品添加剂等开发使用。
关键词:金银花;多酚物质;提取;抑菌
引言
金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾,又称双花、金花、银花[1],因为忍冬花初期是白色,经过一段时间后转为黄色,故命名为金银花,我国金银花栽培历史悠久,花、叶、茎都能作为药材使用[2]。金银花有清热解毒的功能,它能退热清火、消炎止痛,却没有胃肠道的副反应,享有“药铺小神仙”之誉,深受医患的欢迎[3]。金银花在2012年就被原国家卫生和计划生育委员会批准作为药食同源食品原料[4],是一种对人类健康有极大益处的植物。
研究表明金银花有广谱抗菌作用对多种致病菌都有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌和杀菌作用最为明显[5],防治细菌类疾病通常使用的是抗生素,但是抗生素的广泛使用会使细菌具有抗性,为以后的治疗带来难度,由于中草药具有广泛来源、不宜生产耐药性且毒副作用较小的特点,因此受到广泛关注[6]。另一方面金银花中含有丰富的多酚、有机酸、黄酮类等成分,随着当前我国动物食品安全性的提高,金银花以其纯天然、无残留、毒性小,兼具营养与药用的特性而被养殖业高度重视[7]。金银花来源广泛,原料容易取得,加工成本低,在未来医药和临床治疗上将会起到重要作用。
本研究主要研究金银花多酚的两种提取方法和金银花多酚对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、粘质沙雷氏菌的抑制作用,为临床医药和新型植物源食品防腐剂提供理论依据,对有效利用金银花,拓宽金银花利用途径有重要意义。
1.材料与方法
1.1主要材料与仪器
1.1.1材料
金银花购于中药材店,置于烘箱于40℃烘干后,粉碎机打碎烘干后的金银花呈粉末状,过筛保存。大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、粘质沙雷氏菌的菌种均为实验室保存。
1.1.2实验药品
无水乙醇、福林酚、无水碳酸钠、没食子酸标准品、胰蛋白胨、氯化钠、牛肉膏、琼脂粉、磷酸缓冲液(PBS),红四氮唑(TTC)均为化学纯。
1.1.3培养基
制作牛肉膏蛋白胨培养基,称取蛋白胨5g、牛肉膏1.5g、氯化钠2.5g、琼脂10g溶于500ml蒸馏水中,用氢氧化钠溶液调pH至7.2左右,灭菌备用。
1.1.4实验仪器
DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌水浴锅(力辰科技有限公司)、DHG-9101.0A型电热恒温鼓风干燥箱(上海三发科学仪器有限公司)、722型分光光度计(上海仪电)、TGL-16型高速离心机(金坛市新锐科技)、FA1104型电子天平(上海越平科学仪器有限公司、SHP-25生化培养箱(上海三发科学仪器有限公司)、BBS-SDC-A超净工作台(博科生物公司)
1.2实验内容
1.2.1多酚含量的测定
溶剂提取法是根据天然产物中各种化学成分在溶剂中的溶解性质,将有效成分从金银花组织中溶解出来的方法,溶剂可分为水、亲水性有机溶剂和亲油性有机溶剂[8]。本文以蒸馏水和乙醇溶剂为代表,研究溶剂为水、有机溶剂时,哪种方法金银花中多酚提取率较高。
1.2.1.1标准曲线的制作
用没食子酸做标准曲线,采用福林(Folin)-酚比色法来测定金银花提取液多酚含量,用称量纸称取0.10g没食子酸粉末,加入适量蒸馏水溶于烧杯中,转移至100ml容量瓶中进行定容。再分别
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