3版仪器分析第1节-概述课件.pptVIP

2025-3-28

第十一章

高效毛细管电泳分析

一、概述

generalization

二、经典电泳分析法

traditionalelectrophoresis

三、高效毛细管电泳分析法

highperformancecapillaryelectrophoresis

第一节

概述

generalization

Highperformancecapillaryelectrophoresis,HPCE

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一、概述generalization

在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移速率不同，可实现分离。

1937年，Tiselius(瑞典)将蛋白质混合液放在两段缓冲溶液之间，两端施以电压进行自由溶液电泳，第一次将人血清提取的蛋白质混合液分离出白蛋白和α、β、γ球蛋白；

发现样品的迁移速度和方向由其电荷和淌度决定；

第一次的自由溶液电泳；第一台电泳仪；

1948年，获诺贝尔化学奖；

（动画）

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二、经典电泳分析

traditionalelectrophoresis

利用电泳现象对某些化学或生物物质进行分离分析的方法和技术叫电泳法或电泳技术。

按形状分类：U型管电泳、柱状电泳、板电泳；

按载体分类：滤纸电泳、琼脂电泳、聚丙烯酰胺电泳、自由电泳；

传统电泳分析：操作烦琐，分离效率低，定量困难，无法与其他分析相比。

1981年，Jorgenson和Luckas，用75m内径石英毛细管进行电泳分析，柱效高达40万/m，促进电泳技术发生了根本变革，迅速发展成为可与GC、HPLC相媲美的崭新的分离分析技术——高效毛细管电泳。

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三、高效毛细管电泳分析

highperformancecapillaryelectrophoresis

高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进：

一是采用了0.05mm内径的毛细管,；

二是采用了高达数千伏的电压。

毛细管的采用使产生的热量能够较快散发，大大减小了温度效应，使电场电压可以很高。

电压升高，电场推动力大，又可进一步使柱径变小，柱长增加，

高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱，理论塔板数高达几十万块/米，特殊柱子可以达到数百万。

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分离过程

电场作用下，毛细管柱中出现：电泳现象和电渗流现象。

带电粒子的迁移速度=电泳+电渗流；两种速度的矢量和。

正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出；

中性粒子无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流出；

阴离子：两种效应的运动方向相反。ν电渗流ν电泳时,阴离子在负极最后流出,在这种情况下,不但可以按类分离,除中性粒子外,同种类离子由于受到的电场力大小不一样也同时被相互分离。

（动画）

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高效毛细管电泳的特点

1.仪器简单、易自动化

电源、毛细管、检测器、溶液瓶

2.分析速度快、分离效率高

在3.1min内分离36种无机及有机阴离子，4.1min内分离了24种阳离子；分离柱效：105～107/m理论塔板数；

3.操作方便、消耗少

进样量极少，水介质中进行；

4.应用范围极广

有机物、无机物、生物、中性分子；生物大分子等；

分子生物学、医学、药学、化学、环境保护、材料等；

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内容选择

结束

第一节概述

generalization

第二节高效毛细管电泳的理论基础

basictheoryofHPCE

第三节高效毛细管电泳仪器

highperformancecapillaryelectrophoresisapparatus

第四节高效毛细管电泳的分离模式

separatetypesofHPCE

第五节应用与进展

applicationandadvancesofHPCE

下课了，回顾学习一个小故事吧！

学习目标

1、复述故事，深入理解文章内容，初步把握人物形象。

2、学会利用文中关键词句分析人物形象。

3、体会文章所揭示的深刻道理。

故事发生的时间、地点、人物、事件的起因、经过和结果要复述清楚。

看图复述课文内容

自学指导(一)

1、作者运用哪几种方法去刻画人物的形象？从文中找出具体句子进行分析。并说说你是如何看待这两个人物的。

2、从这个故事中你懂得了什么道理？

自学指导(二)

陈尧咨（善射）

卖油翁（善酌）

动作

神态

语言

睨之

无他，但手熟尔

以我酌油知之

我亦无他，惟手熟尔

汝亦知射乎

吾射不亦精乎

尔安