3.2基因工程的基本操作程序第1课时课件-高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

第3章基因工程;;基因工程培育抗虫棉的思路：;与载体拼接;基因工程的基本操作程序;定义：;筛选方法：从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选;2.利用PCR获取和扩增目的基因;体内DNA复制条件;（2）PCR反应过程：;1）变性：

当温度上升到_______以上时，断裂，双链DNA解聚为两条。;2）复性：

当温度下降到50℃左右时，两种引物通过与两条单链DNA结合。;活动1.根据查询的Bt基因编码链序列，尝试设计引物。小组内合作讨论完成

要求：1.写出互补链的碱基序列，并注明方向。

2.从①－④中选择2个合适的位置设计引物，写出引物的部分序列，并注明方向。;1、概念：;5、PCR扩增的前提是：;3）延伸：

当温度上升到______左右时，溶液中的4种____________在耐高温的____________的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。;1个DNA片段;一个DNA，一对引物（A与B），通过PCR扩增n次：

①子代DNA分子中等长链DNA分子数为：______个

②子代DNA分子中不等长链DNA分子数为：_______个

③子代DNA分子中含模板链DNA分子数为：_______个

④子代DNA分子中含引物A（或B）的DNA分子数为：______个

⑤复制过程中共需引物________个

⑥第n次复制需要引物_________个;【检测】“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物(注：引物的作用是与模板链形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸)，两种引物及其与模板链的结合位置如下图甲所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，如下图乙所示，其中第⑤种DNA分子有();深入思考：用PCR可以扩增mRNA吗？;1．PCR技术扩增DNA，需要的条件是（）

①目的基因???②引物???③四种脱氧核苷酸??④mRNA???

⑤DNA聚合酶等???⑥核糖体

A．①②③④B．②③④⑤C．①③④⑤ D．①②③⑤;获取了足够量的目的基因后，能直接把目的基因导入受体细胞吗？;;载体≠表达载体：

1.二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。

2.表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构。;易错提醒;1个或2个

两个黏性末端

（平末端）;1??单酶切（同一种酶）：;使用一种限制酶进行切割Bt基因和pBI121质粒，共有几种连接情况？

请大家尝试用胶带模拟DNA连接酶进行操作。;问题探讨;图解限制酶的选择原则;当堂巩固