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第4节蛋白质工程的原理和应用
血红蛋白的三级结构;
用细菌画的画
●1.科学家利用了什么技术让细菌能发出荧光?
基因工程技术使细菌表达了荧光蛋白。
2.科学家是怎样对蛋白质分子进行设计和改造的呢?
最早被发现是绿色荧光蛋白,科学家通过改造它,获得了黄色荧光蛋白等。在细胞生命活动的检测、肿瘤的示踪研究等领域有重要应用。;
情境导入
探究新知
一.蛋白质工程崛起的缘由
二.蛋白质工程的基本原理
三.蛋白质工程的应用
课堂小结
课堂练习;
蛋白质工程
以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过改造或合成基因
,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求;;
实例
赖氨酸含量低
合成时需:
天冬氨酸激酶;
二氢吡啶二羧酸合成酶。
苏氨酸(352位)
产量提高
异亮氨酸
异亮氨酸;
7
二.蛋白质工程的基本原理
1.目标:根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造,
由于基因决定蛋白质,因此,对蛋白质的结构进行设计改造,最终通过改造或合成基因来完成。;
前提:了解蛋白质结构和功能的关系
目的:生产出符合人们生活需要的蛋白质
起点:蛋白质的预期功能
终点:获得大量的改造后的蛋白质
实质:改造基因结构;
◆实例:提高水蛭素的抗凝血效率
水蛭素第47位天冬酰胺改造成赖氨酸或精氨
酸,以此来提高抗凝血效率,可提高4倍。
水蛭素是自然界存在的最强抗凝血物质,
在防治心脑血管疾病和抗癌方面等具有特效。;
pleatedsheet
+H?N
Examplesof
aminoacid
subunits
helix
借助计算机构建蛋白质三维结构图;
克隆载体质粒
GAG=
转专录
翻G译AC
天冬氨酸
合成正常的蛋白质;
项目;
项目蛋白质工程基因工程;
思考:如何辨别一个操作是基因工程还是蛋白质工程?
蛋白质工程
是否合成
是否对
原有基
因进行
改造
基因工程
是否为天
然蛋白质
蛋白质工程;
天然蛋白质易形成
二聚体或六聚体
阻碍胰岛素从注射
部位进入血液,延
???了降血糖作用
B28位脯氨酸替换为天
冬氨酸或将它与B29位
的赖氨酸交换位置
行使速效胰岛素类
功能似物;;
点突变DNA
53ACA
mRNA
35UGU
氨基酸链Cys
NH
1
8
0
100
30
oPo
蛋白质空间结构蛋白质空间结构;
可变区恒定区;
蛋白质工程被广泛用于改进酶的性能或开发新的工业用酶。
如枯草杆菌蛋白酶具有水解蛋白质的作用,常被用于洗涤剂工业、丝绸工业等。迄今为止,利用蛋白质工程获得的该酶的突变体已有上百种,从中可能筛选出一些符合工业化生产需求的突变体,从而提高这种酶的使用价值。;
1.蛋白质工程的一般过程
新蛋白质
预期功能
新蛋白质
新功能
2.蛋白质工程的设计思路和应用;
课堂练习
1.科研人员利用相关技术改变了胰岛素B链的第9位氨基酸,从而避免了
胰岛素结合成无活性的二聚体形式。下列相关叙述不正确的是(D)
A.胰岛素的本质是蛋白质,不宜口服使用
B.可通过测定DNA的序列确定突变是否成功
C.对胰岛素结构的改造属于蛋白质工程
D.该过程的操作对象是胰岛素分子
蛋白质工程从属于基因工程,蛋白质工程的操作对象是基因;
课堂练习
2.扰素在体外保存非常困难。干扰素由166个氨基酸组成,如果将其分子上第
17位的一个半胱氨酸变成丝氨酸,那么在70℃的条件下可以保存半年。若利用蛋白质工程的原理和方法生产新型干扰素,下列思路最可行的是(B)
A.用DNA合成仪合成新的干扰素基因
B.利用基因定点突变技术改造干扰素基因
C.直接改造mRNA,进行密码子的替换
D.生产正常干扰素,再进行氨基酸的替换
蛋白质工程的目的是改造蛋白质,但其方法是通过改造或合成基因来实现的,而不是直接改造氨基酸;若直接改造mRNA,可获得改造后的蛋白质,但不能遗
传、不能复制。
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