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赤霉素检测方法
1、原理
试样经甲醇提取、浓缩并净化后，用高效液相色谱法检测，外标法定量。
2、试剂
以下试剂，除特殊说明外，均为分析纯。
1）甲醇：色谱纯。
2）冰乙酸。
3）赤霉素标准品。
4）0.6%冰乙酸溶液：准确称取0.6mL冰乙酸，加水并定容至100mL。
5）0.1mg/mL赤霉素标准液：准确称取0.010g赤霉素标准品于100mL容量瓶中，
用流动相溶解并定容至刻度。
3、仪器
高效液相色谱仪：配紫外检测器。
分析天平：感量0.0001g一台。
超声波清洗器。
容量瓶：25mL、100mL。
微孔滤膜：0.45μm。
4、测定
4.1样品制备
准确称取样0.10g，置于25mL容量瓶中，加约20mL甲醇，在超声水浴
中超声20min，用甲醇定容至刻度，放置4h后经0.45μm滤膜过滤，备用。
4.2标品处理
将配制的标准液经0.45μm滤膜过滤，过滤后所得滤液作为对照溶液。
4.3测定
4.3.1色谱条件
色谱柱：C18色谱柱，150mm×4.6mm，5μm，或性能相当者。
流动相：甲醇：0.6%冰乙酸溶液=35：65。
紫外检测器：波长为211nm。
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柱温：30℃。
流速：1.0mL/min。
进样体积：20μL。
4.3.2色谱分析
分别注入20μL赤霉素标准液及试样溶液，按上述列出的条件进行液相色
谱分析测定，记录峰面积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内。根据标准品
的保留时间定性，外标法定量。
4.4结果计算
样品中赤霉素含量（X）以毫克每克（mg/g）表示，按下式计算：
式中：
X：样品中赤霉素含量，单位为毫克每克（mg/g）。
A：样品峰面积。
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c:赤霉素标准液浓度数值，单位为毫克每毫升（mg/mL）。
V：试样体积，单位为毫升（mL）。
A：标品峰面积。
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M：样品质量，单位为克（g）。
5、方法定量检出限
本方法定量检出限为：2mg/g。
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