DB37T 2307-2013 长蛸(种质)　规范.docxVIP

ICS65.150B51

山东省地方标准

DB37

DB37/T2307—2013

长蛸(种质)

SpeciesidentificationofOctopusminor

2013-04-01发布2013-05-01实施

山东省质量技术监督局

发布

I

DB37/T2307—2013

前言

本标准按GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省海洋与渔业厅提出。

本标准由山东省渔业标准化技术委员会归口。

本标准负责起草单位：马山集团有限公司、中国海洋大学。

本标准主要起草人：郑小东、王培亮、李琪、李开锋、钱耀森、于瑞海、左仔荣、常忠岳、崔玉龙。

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长蛸(种质)

1范围

本标准规定了长蛸(Octopusminor(Sasaki,1920))的名称与分类、主要生物学性状、生长与繁殖、遗传特性及检测方法。

本标准适用于长蛸种质检测与鉴定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分:抽样方法

GB/T18654.13养殖鱼类种质检验第13部分：同工酶电泳分析

3名称与分类

3.1学名

长蛸Octopusminor(Sasaki,1920),Octopusvariabilis(Sasaki,1929)为其同物异名。3.2分类

软体动物门（Mollusca），头足纲（Cephalopoda），八腕目（Octopoda），蛸科（Octopodidae），蛸属（Octopus）。

4主要生物学性状

4.1外部形态特征4.1.1外形

胴体长卵形，胴长约为胴宽的2倍；体表光滑，具极细的色素色斑。长腕型，腕长约为胴长的6-7倍，各腕长度不等，第一对腕最长也最粗，其腕径约为其他腕径的两倍，腕式为1＞2＞3＞4，腕吸盘两行，基部为一行。雄性右侧第3腕茎化，甚短，仅约为左侧对应腕长度的二分之一；端器匙形，大而明显，约为全腕长度的六分之一。

长蛸外部形态见图1

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图1长蛸外部形态

4.1.2可数性状

4.1.2.1腕式：1234

4.1.2.2齿式：3·1·3

4.2内部构造特征

口球内具颚片和齿舌，齿舌的中央齿为五尖型，第一侧齿甚小，齿尖居中，第2侧齿基部边缘较平，齿尖略偏一侧，第3侧齿近似弯刀状，边缘齿外侧具有发达的缘板结构。雄性的阴茎略呈“6”字形，膨胀部卷成螺旋状，阴茎部较短。漏斗器W型。半鳃片数约9~10个。

5生长与繁殖特性

5.1生长

生长迅速，半年全长可到200mm,第二年春季一般可达300mm～400mm。

5.2繁殖

5.2.1一年性成熟，繁殖期间有短距离洄游。

5.2.2产卵习性：性腺一年成熟一次，卵分批产出，卵子长茄型，长径13mm~20mm,短径4mm~6mm。

5.2.3繁殖水温：20℃~26℃,最适水温22℃~24℃。

5.2.4怀卵量：全长540mm~560mm雌体，怀卵量80～140个左右。

6遗传特性

6.1同工酶特性

同工酶G?PD、AAT和SOD酶谱见图2～图4

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图2长蛸同工酶G?PD酶谱

图3长蛸同工酶AAT酶谱

图4长蛸同工酶SOD酶谱

6.2微卫星DNA分子检测特征

微卫星DNA分子检测特征见图5、图6

图5引物0MO7扩增长蛸肌肉组织DNA的凝胶电泳图谱

图6引物0M09扩增长蛸肌肉组织DNA的凝胶电泳图谱

7检测方法

7.1抽样方法

参照GB/T18654.2的规定执行。

7.2同工酶分析

7.2.1凝胶缓冲液和电泳缓冲液的制备

凝胶缓冲液见附录A,电泳缓冲液见附录B。

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7.2.2分析样品的制备

电泳前取0.3g样品放入1.5ml离心管，加入等体积的提取液后置于冰浴中研磨，研磨混合液置于冷冻离心机中，在4℃、12000rpm的条件下离心直至上清液澄清，取上清液冷冻保存备电泳用。

7.2.3凝胶制备

加淀粉30g和制胶缓冲液254ml，在三角烧瓶内混匀，加热至沸腾，抽气，然后注入制胶模具中，冷却后，保鲜膜密封保存备用。

7.2.4电泳步骤

用手术刀在凝胶距离边三分之一（约2.5cm）处切开，用