DB36T-实验动物 小鼠肝炎病毒荧光定量PCR检测方法.pdf

ICS65.020.30

CCSB44

DB36

江西省地方标准

DB36/TXXXX—XXXX

实验动物小鼠肝炎病毒荧光定量PCR检

测方法

LaboratoryanimalRealtime-PCRmethodfordetectionofMouseHepatitisVirus

（征求意见稿）

在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

江西省市场监督管理局发布

1

DB36/TXXXXX—XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起

草。

本文件由江西省卫生健康委员会提出。

本文件由江西省市场监督管理局归口。

本文件主要起草单位：江西省职业病防治研究院。

本文件主要起草人：贾菠、周银平、张陆兵、谢金明、万筱荣、汤辉、熊莉娟、肖芳平、孟莎莎、

罗勇兵、刘欢、周剑、李银才

DB36/TXXXXX—XXXX

实验动物小鼠肝炎病毒荧光定量PCR检测方法

1范围

本文件规定了实验动物小鼠肝炎病毒荧光定量PCR检测方法。

本文件适用于江西省辖区内实验动物和实验动物环境中小鼠肝炎病毒的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB14922.2实验动物微生物学等级及监测

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求

GB/T39760实验动物安乐死指南

3术语、定义和缩略语

3.1术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1.1

荧光定量PCR

在常规PCR的基础上，在反应体系中加入特异性荧光探针，利用荧光信号积累实时检测整个PCR进

程，通过检测每次循环中的荧光发射信号，间接反映了PCR扩增的目标基因的量，最后通过扩增曲线对

未知模板进行定性或定量分析。

3.1.2

Ct值cyclethreshold

荧光定量PCR反应中每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。

3.2缩略语

下列缩略语适用于本文件。

RNA核糖核酸(ribonucleicacid)

cDNA互补脱氧核糖核酸(complementaryDNA)

PBS磷酸盐缓冲液(phosphatebufferedsaline)

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RNase核糖核酸酶（ribonuclease）

4检测方法原理

根据小鼠肝炎病毒基因保守区域设计合成一对特异性引物和一条特异性探针，探针两端分别标记一

个报告荧光基团和一个淬灭荧光基