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烤制贝类中杂环胺类物质的检测技术规范

1范围

本标准规定了烤制贝类中的2-氨基-3-甲基咪唑并[4,5-f]喹啉（IQ）、2-氨基-3,4-二甲基-咪唑并[4,5-f]-喹啉（MeIQ）、2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]-吡啶（PhIP）、2-氨基-3,8-二甲基-咪唑并[4,5-?]-喹喔啉（8-MeIQx）、3-氨基-1，4-二甲基-5H-吡啶并[4,3-b]吲哚（Trp-P-1）、3-氨基-1-甲基-5H-吡啶并[4,3-b]吲哚（Trp-P-2）、2-氨基-9H-吡啶并[2,3-b]吲哚（AαC）和2-氨基-3-甲基-9H-吡啶并[2,3-b]吲哚（MeAαC）共8种常见杂环胺的液相色谱-质谱/质谱测定方法。

本标准适用于烤制贝类（牡蛎、扇贝等）中IQ、MeIQ、PhIP、8-MeIQx、Trp-P-1、Trp-P-2，AαC和MeAαC的测定。

2规范性引用文件

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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试样采用氢氧化钠/甲醇溶液提取，固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱检测，内标法定量。

4试剂材料

除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

试剂和材料

4.1试剂要求

4.1.1氢氧化钠：纯度97%

4.1.2乙酸铵：纯度≥98%。

4.1.3甲醇：色谱纯。

4.1.4氯化钠：纯度97%。

4.1.5乙腈：色谱纯。

4.1.6乙酸：色谱纯。

4.1.7甲酸铵：色谱级。

4.1.8微孔滤膜：0.22μm，有机系。

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4.2试剂配制

4.2.1氢氧化钠溶液（40g/L）：称取氢氧化钠40.0g，用水溶解并定容至1L。

4.2.2氢氧化钠溶液（4g/L）：量取40g/L氢氧化钠溶液（3.2.1）50mL，加入水450mL，混合均匀。

4.2.340g/L氢氧化钠-甲醇混合溶液（70+30，体积比）：量取40g/L氢氧化钠溶液70mL，加入甲

醇30mL，混合均匀。

4.2.44g/L氢氧化钠-甲醇混合溶液（45+55，体积比）：量取4g/L氢氧化钠溶液45mL，加入甲醇

55mL，混合均匀。

4.2.5乙醇-二氯甲烷混合溶液（10+90，体积比）：量取乙醇10mL，加入二氯甲烷90mL，混合均匀。

4.2.65%乙腈：量取乙腈5mL，加入水95mL，混合均匀。

4.2.7乙酸-乙酸铵缓冲液：称取乙酸铵1.155g，用水450mL溶解，用乙酸调pH至5.0±0.5，加水

定容至500mL。

4.2.8乙酸缓冲液-乙腈混合溶液(50+50，体积分数）：量取乙酸-乙酸铵缓冲液（3.2.7）50mL，加入

乙腈50mL，混合均匀。

4.3标准品：见附录A

4.3.1内标标准物质norharman-d7、MeIQx-d3，纯度大于97%。

4.4标准溶液配制

4.4.1杂环胺标准储备液：将IQ、MeIQ、PhIP、8-MeIQx、Trp-P-1、Trp-P-2，AαC和MeAαC，分

别用甲醇（1000μg/mL）配制成浓度为1.0mg/L的标准储备液。-18℃避光保存，有效期1个月。

4.4.2混合标准工作液：用流动相（含0.05%甲酸/乙腈的1mmol/L乙酸铵，95/5，v/v）新鲜制备浓

度为0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10、20、50、100、200、500μg/L的混合标准工作溶液。所有混合标准工作溶液均含有20μg/LMeIQx-d3和norharman-d7内标液，现配现用。

5仪器与设备

5.1液相色谱串联四极杆质谱：配有电喷雾离子源。

5.2电子天平:感量为0.01mg、1mg。

5.3pH计:感量为0.01。

5.4高速离心机，转速不低于10000r/min。

5.5氮气浓缩仪。

5.6固相萃取装置。

5.7均质器。

5.8旋涡振荡器。

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5.90.22μm聚四氟乙烯（PTFE）过滤器。

5.10色谱柱：ACQUITYUPLCHSST3(100mm×2.1m