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分子生物学实验操作技巧题

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1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和地址名称。

2.请仔细阅读各种题目，在规定的位置填写您的答案。

一、选择题

1.DNA双螺旋结构的提出者是？

A.JamesWatson和FrancisCrick

B.RosalindFranklin

C.LinusPauling

D.MauriceWilkins

2.限制性核酸内切酶识别序列的特点是？

A.通常具有回文序列

B.只能识别单链DNA

C.只能识别双链DNA

D.不具有特异性

3.聚合酶链反应（PCR）技术的基本原理是？

A.利用DNA连接酶复制DNA

B.利用DNA聚合酶复制DNA

C.利用RNA聚合酶复制DNA

D.利用逆转录酶复制DNA

4.质粒转化细菌最常用的方法是？

A.电穿孔法

B.琼脂糖电泳法

C.螺旋介导法

D.脂质体介导法

5.Southern印迹分析中，探针的类型是？

A.单链DNA

B.双链DNA

C.RNA

D.蛋白质

6.Northern印迹分析中，检测的是哪种分子？

A.DNA

B.RNA

C.蛋白质

D.多肽

7.Western印迹分析中，检测的是哪种分子？

A.DNA

B.RNA

C.蛋白质

D.多肽

8.真核生物基因表达调控的关键步骤是？

A.mRNA的转录

B.mRNA的加工

C.蛋白的翻译

D.蛋白的修饰

答案及解题思路：

1.答案：A.JamesWatson和FrancisCrick

解题思路：JamesWatson和FrancisCrick在1953年提出了DNA双螺旋结构，这一发觉对分子生物学和遗传学产生了深远的影响。

2.答案：A.通常具有回文序列

解题思路：限制性核酸内切酶识别序列通常是回文序列，这意味着序列在反向互补链上是相同的，这有助于酶在双链DNA中精确地切割。

3.答案：B.利用DNA聚合酶复制DNA

解题思路：PCR技术通过DNA聚合酶在特定引物引导下复制DNA片段，从而放大目标DNA序列。

4.答案：A.电穿孔法

解题思路：电穿孔法是质粒转化细菌中最常用的方法之一，通过电脉冲使细菌细胞膜暂时通透，使质粒进入细胞内。

5.答案：A.单链DNA

解题思路：Southern印迹分析中，探针通常是单链DNA，用于与固定在膜上的DNA条带进行杂交。

6.答案：B.RNA

解题思路：Northern印迹分析用于检测特定RNA分子，通过探针与RNA条带杂交来识别目标RNA。

7.答案：C.蛋白质

解题思路：Western印迹分析用于检测蛋白质，通过抗体与目标蛋白结合来识别和定量蛋白质。

8.答案：A.mRNA的转录

解题思路：真核生物基因表达调控的关键步骤之一是mRNA的转录，这是基因表达的第一步，决定了后续的翻译和蛋白质合成。

二、填空题

1.DNA复制过程中，DNA聚合酶I的主要功能是______。

答案：切除RNA引物并填补DNA缺口。

解题思路：DNA聚合酶I在DNA复制过程中负责移除RNA引物，因为RNA引物不是DNA的组成部分。接着，它使用DNA作为模板，在原有的DNA链上填补由RNA引物留下的缺口，保证DNA复制的连续性。

2.RNA聚合酶Ⅱ的主要作用是合成______。

答案：mRNA。

解题思路：RNA聚合酶Ⅱ是细胞中主要的转录酶，它主要负责合成mRNA（信使RNA），这是基因表达过程中将遗传信息从DNA传递到细胞质，进而翻译成蛋白质的关键分子。

3.质粒在分子克隆中起______作用。

答案：克隆载体。

解题思路：质粒是小型、环状DNA分子，能够在宿主细胞中自我复制。在分子克隆中，质粒被用作载体来携带外源DNA片段，使其在宿主细胞内复制，从而实现外源基因的克隆。

4.重组质粒的筛选标志可以是______。

答案：抗生素抗性基因。

解题思路：为了筛选成功重组的质粒，常常在宿主细胞中引入抗生素抗性基因。这样，那些含有重组质粒的细胞才能在含有相应抗生素的培养基中生长，因此抗生素抗性基因成为重组质粒的筛选标志。

5.Southern印迹分析中，目的基因被切成的片段长度可以通过______来判断。

答案：凝胶电泳。

解题思路：Southern印迹分析是一种检测特定DNA序列的方法。通过凝胶电泳分离目的基因的片段，根据其在凝胶中的迁移率（即片段长度）来判断其大小。

6.Northern印迹分析中，目的基因的转录水平可以通过______来判断。

答案：与探针的