大豆疫霉种群动态监测技术规程 DB2301 T 200-2024.pdfVIP

ICS65.020.20

CCSB16

2301

黑龙江省哈尔滨市地方标准

DB2301/T200—2024

大豆疫霉种群动态监测技术规程

2024-12-30发布2025-02-05实施

哈尔滨市市场监督管理局  发布

DB2301/T200—2024

大豆疫霉种群动态监测技术规程

1范围

本文件规定了大豆疫霉种群动态监测的田间样本采集、室内检测、生理小种鉴定、种群动态监测、

灭活和档案管理。

本文件适用于大豆疫霉生理小种的种群动态监测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

NY/T2114—2012大豆疫霉病菌检疫检测与鉴定方法

DB2301/T151大豆疫霉根腐病菌生理小种鉴定技术规程

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4田间样本采集

4.1取样地点

在大豆主栽区生产田和品种试验田的长期定位点调查和采集大豆疫霉根腐病病样（病株和病土）。

4.2取样时期

取样时期为每年的6月～8月。

4.3取样方法

4.3.1病株取样

采集定位点具有典型病症的大豆疫霉根腐病病株，每个地块取样5株～10株，用灭菌牛皮纸袋带回

实验室。

4.3.2病土取样

每个定位点随机取样10份，每份取根际土为200g，混匀后带回实验室，自然阴干。

4.4样本记录

1

DB2301/T200—2024

每个样本需记录样本数量、样本来源、品种名称、取样部位、采集日期和采集人信息。

5室内检测

5.1大豆疫霉分离及鉴定

大豆疫霉分离及鉴定应按NY/T2114中的7.1和7.3的规定执行。

5.2菌株的纯化

筛选出的目标菌落转移至V8培养基上纯化4次～6次，转移至V8培养基试管斜面上注明菌株编号、

培养日期。

5.3菌株的保存

待菌丝长满斜面后至于8℃恒温箱中保存用于后续生理小种检测，菌株需每隔6个月～8个月继代

活化一次。

6生理小种鉴定

6.1大豆植株的培养

将8个鉴别寄主和感病品种分别挑选15粒饱满种子播种于以无菌蛭石的培养钵中，出苗前温度控制

在25℃～29℃，出苗后温度控制在18℃～25℃。出苗后间苗至10株/钵，每个处理重复3次。

6.2接种

大豆苗长至真叶期，将25℃黑暗培养8d含有大豆疫霉菌菌丝的培养基，用灭菌解剖刀切成3mm×3

mm的方块菌碟，应用下胚轴伤口接种法进行接种。

6.3病情调查

6.3.1调查时间

接种后5d～7d对大豆苗下胚轴进行病情调查。

6.3.2致病性测定

大豆植株病斑反应型分为3种，≥70%植株死亡记为感病(S)、≤30%植株死亡记为抗病(R)、30%～

70%植株死亡记为中间类型(IRT)，试验重复3次。

6.3.3有效性判别

当设置的感病对照材料鉴定为感病，该批次鉴定视为有效。

6.4生理小种确定

调查各菌株与8个鉴别寄主互作反应结果，列出感病互作中Rps基因，即为该菌株致病型。生理小

种的确定应按DB2301/T151—2024中附录C执行。

7种群动态监测

2