真核生物转录及转录水平的调控.ppt

TFⅡD（TBP+TAFⅡ）识别和结合TATA框TFⅡA稳定TFⅡD与TATA框的结合TFⅡB结合TBP，引进TFⅡF-PolⅡ复合物TFⅡF与PolⅡ结合，参与解链RNAPolⅡ催化RNA的合成TFⅡE引入TFⅡH并提高其活性TFⅡH解开双链，为起始转入延伸阶段所必需Generaltranscriptionfactors(TFs)第30页，共47页，星期日，2025年，2月5日第31页，共47页，星期日，2025年，2月5日第3节转录激活因子结构第32页，共47页，星期日，2025年，2月5日真核生物转录因子的结构转录激活域DNA结合域二聚体结构域第33页，共47页，星期日，2025年，2月5日第1页，共47页，星期日，2025年，2月5日启动子-调控元件基本转录调控因子-RNA聚合酶[基本转录机器]控制着基因的低水平表达，而特异（+/-）转录调控因子结合在特异（+/-）调控元件改变DNA构象（染色质重塑或核小体解聚）暴露出启动子区域并直接或间接通过中介蛋白复合体调控基本转录机器起始频率。第2页，共47页，星期日，2025年，2月5日真核生物基因表达调控水平第3页，共47页，星期日，2025年，2月5日真核生物蛋白编码基因结构模式第4页，共47页，星期日，2025年，2月5日.5′cap5′非编码区编码区3′非编码区3′poly(A)tail第5页，共47页，星期日，2025年，2月5日第6页，共47页，星期日，2025年，2月5日CTD磷酸化招募加帽、剪接机器和加尾机器来完成pre-mRNA加工。第7页，共47页，星期日，2025年，2月5日3端形成过程poly(A)信号序列和与相关蛋白因子组成切割/多聚腺苷酸化的复合物来完成多聚苷酸化过程。分裂/多聚腺苷酸化特异因子(cleavage/polyadenylationspecificityfactor，CPSF)与加尾信号序列（AAUAAA）特异结合，切割刺激因子(cleavage-stimulatoryfactor，CstF)与poly(A)位点下游富含G/U序列结合进一步加强了CPSF结合。切割因子(cleavagefactors，CF)将前体mRNA切断，随后和CPSF结合的poly(A)聚合酶(poly(A)polymerase，PAP)添加poly(A)尾。poly(A)结合蛋白（poly(A)bindingprotein,PABP）稳定poly(A)尾。引自Proudfoot等,cell,2002第8页，共47页，星期日，2025年，2月5日基础因子抑制剂激活剂辅激活剂（中介蛋白复合体）第9页，共47页，星期日，2025年，2月5日第10页，共47页，星期日，2025年，2月5日组蛋白乙酰化和脱乙酰化影响染色质的紧密程度从而影响基因转录。第11页，共47页，星期日，2025年，2月5日第12页，共47页，星期日，2025年，2月5日第一节真核生物RNA聚合酶的分离、鉴定和功能第13页，共47页，星期日，2025年，2月5日RNA聚合酶亚基分离鉴定（表位标签技术）

第14页，共47页，星期日，2025年，2月5日酶位置产物活性比较对α-鹅膏菌素的敏感性RNA聚合酶ⅠRNA聚合酶ⅡRNA聚合酶ⅢRNA聚合酶Ⅰ合成RNA的活性最显著。它位于核仁中，负责转录编码rRNA的基因(称rDNA)。另一主要的酶是RNA聚合酶Ⅱ，它位于核质中，主要负责核内不匀一RNA(hnRNA)的合成,而hnRNA是mRNA的前体。RNA聚合酶Ⅲ负责合成tRNA和许多小的核内RNAs。真核细胞的三种RNA聚合酶的一般性质核仁rRNA50-70%不敏感核质hnRNAsnRNA20-40%敏感核质tRNA5SRNAsnRNA10%高浓度敏感第15页，共47页，星期日，2025年，2月5日第16页，共47页，星期日，2025年，2月5日RNA聚合酶亚基组成

（进化特征）Figure8.EukaryoticRNApolymeraseIIhas10subunits.羟基末端域（carboxy-terminaldomain:CTD）Tyr-Ser-Pro-Thr-